[發明專利]LIGHT作為免疫佐劑制備重組病毒疫苗

在審

• 申請號: 201610552226.1
• 申請日: 2016-07-13
• 公開（公告）號: CN107617104A
• 公開（公告）日: 2018-01-23
• 發明（設計）人: 王蒲;鄒軍輝;盧曉華;鄭威;趙琦
• 申請（專利權）人: 中國科學院深圳先進技術研究院
• 主分類號: A61K39/39
• 分類號: A61K39/39;A61K39/245;A61K39/12;A61K48/00;A61P31/20;A61P31/22;A61P37/04
• 代理公司: 北京三友知識產權代理有限公司11127
• 代理人: 韓蕾,姚亮

1.LIGHT作為免疫佐劑在制備EBV和HPV的重組病毒疫苗中的應用。

2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述LIGHT包括LIGHT基因、LIGHT蛋白、和/或pcDNA3.1(+)-LIGHT質粒；所述重組病毒疫苗為重組EBV疫苗或重組HPV疫苗。

3.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，LIGHT作為免疫佐劑增強疫苗刺激機體產生抗體、誘發機體產生體液免疫應答、刺激機體產生細胞免疫應答的能力。

4.LIGHT作為免疫佐劑制備的重組病毒疫苗，其特征在于，所述LIGHT包括pcDNA3.1(+)-LIGHT質粒和/或LIGHT蛋白；所述重組病毒疫苗包括重組病毒DNA疫苗和/或重組病毒蛋白疫苗；所述重組病毒DNA疫苗由pcDNA3.1(+)-LIGHT質粒聯合病毒DNA疫苗獲得；所述重組病毒蛋白疫苗由LIGHT蛋白聯合病毒蛋白疫苗獲得。

5.一種重組病毒DNA疫苗，其采用權利要求4所述的pcDNA3.1(+)-LIGHT質粒作為免疫佐劑，其是按照包括以下步驟的制備方法制備得到的：

利用LIGHT基因與pcDNA3.1(+)質粒構建重組表達載體pcDNA3.1(+)-LIGHT質粒；

pcDNA3.1(+)-LIGHT質粒與病毒DNA疫苗聯合獲得重組病毒DNA疫苗。

6.根據權利要求5所述的重組病毒DNA疫苗，其特征在于，所述病毒DNA疫苗包括EBV DNA疫苗和/或HPV DAN疫苗。

7.根據權利要求5所述的重組病毒DNA疫苗，其特征在于，構建重組表達載體pcDNA3.1(+)-LIGHT質粒的步驟為：

PCR擴增LIGHT基因并與pcDNA3.1(+)質粒進行雙酶切；

酶切后的LIGHT基因與pcDNA3.1(+)質粒連接；

連接后的產物轉化宿主細胞，培養宿主細胞，并酶切鑒定，獲得陽性克隆重組表達載體pcDNA3.1(+)-LIGHT質粒。

8.根據權利要求4-7任意一項所述的重組病毒DNA疫苗，其特征在于，LIGHT基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。

9.一種重組病毒蛋白疫苗，其是采用權利要求4所述的LIGHT蛋白作為免疫佐劑聯合病毒蛋白疫苗獲得的，其特征在于，所述LIGHT蛋白是由所述pcDNA3.1(+)-LIGHT質粒轉染宿主細胞表達獲得；所述LIGHT蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。

10.根據權利要求4或9所述的重組病毒蛋白疫苗，其特征在于，所述病毒蛋白疫苗包括人乳頭瘤病毒早期轉錄蛋白HPV E6、E7和/或EB病毒核抗原EBNA1。