[發明專利]一種鴨兒芹的組織培養方法

有效

• 申請號: 201610546709.0
• 申請日: 2016-07-07
• 公開（公告）號: CN105993958B
• 公開（公告）日: 2017-11-21
• 發明（設計）人: 許陶昀;陳超;何杭鳳;陳丹萍;張平
• 申請（專利權）人: 嘉興職業技術學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 浙江永鼎律師事務所33233
• 代理人: 陸永強

技術領域

本發明涉及一種鴨兒芹的繁育方法，特別地涉及一種鴨兒芹的組織培養方法，屬于農業栽培技術領域。

背景技術

鴨兒芹(Cryptotaenia japonica Hassk.f.japonica)屬傘形科，鴨兒芹屬，為多年生草本。通常生于海拔200-2400米的山地、山溝及林下較陰濕的地區。我國南北各省(區)均有分布，朝鮮和日本也有。

鴨兒芹可全草入藥，治虛弱，尿閉及腫毒等，民間有用全草搗爛外敷治蛇咬傷。種子含油約22％，可用于制肥皂和油漆。鴨兒芹是日本重要的栽培蔬菜之一。主要食用柔嫩的莖葉，有特殊的風味，主要用作湯料或做成“色拉”菜生食。因其易于生長，耐陰濕環境，也可作地被植物，應用于園藝造景中的角落、林下等蔭蔽環境。因此，鴨兒芹無論對調劑市場蔬菜品種，對有機蔬菜的生產和創匯型農業的開發，還是豐富園林造景中地被植物的栽培種類，都具有十分重要的意義。

目前關于鴨兒芹的研究極少，國內的研究領域主要涉及一些特性的簡單描述，以及種子萌發和栽培技術的研究。鴨兒芹休眠期長、種子萌發慢、發芽率普遍較低，采用常規的種子繁殖方法速度慢。國內僅有一篇文獻涉及到鴨兒芹種子休眠破除的方法，但從種子處理到發芽仍需要較長的時間(35～50天)，并未加快種子發芽速度。組織培養技術具有繁殖速度快、繁殖系數大，繁殖后代整齊一致，能保持原有品種的優良性狀，不受季節的限制等優點，目前國內對鴨兒芹的組織培養研究僅有一篇報道，并且存在側芽誘導率低、愈傷組織不能繼續分化產生不定芽的問題，無法進行鴨兒芹的大量繁殖。

授權公告號為CN 103988667B，授權公告日為2016年3月23日的中國授權發明專利中，公開了一種鴨兒芹引種栽培方法，該發明能使鴨兒芹發芽快，發芽率高，用該發明的栽培方法能實現鴨兒芹周年生產和高產。但是，這種鴨兒芹的引種栽培方法，所需的時間較長，且種子的發芽率較低，并不適合大量繁殖。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術中存在的上述不足，而提供一種繁殖系數提高，適合大量繁殖的的鴨兒芹的組織培養方法。

本發明解決上述問題所采用的技術方案是：該一種鴨兒芹的組織培養方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)外植體消毒處理：選取生長良好的鴨兒芹一年生嫩莖，依次用洗衣粉浸泡10min，自來水沖洗3h，用75％乙醇滅菌20～40s，無菌水沖洗3～5次，再用質量濃度為1.5～3.5％的NaClO滅菌5～10min，無菌水沖洗3～5次后，用滅菌濾紙吸干表面水分，最后將消毒處理后的鴨兒芹置于無菌干凈的培養皿中備用；

(2)愈傷組織誘導：將步驟(1)中消毒好的鴨兒芹嫩莖切成約1cm的小段，豎直插入誘導培養基中，進行暗培養30天，溫度23～25℃；

(3)分化培養：將步驟(2)中產生的愈傷組織接入分化培養基中培養6周，溫度23～25℃，光照12h/d，光照度為2000～2400lx；

(4)生根培養：將步驟(3)中產生的叢生芽切成單株，接入生根培養基中培養，溫度23～25℃，光照12h/d，光照度為2000～2400lx，2周后，基部長出根系，長度達到2～5cm；

(5)煉苗和移栽：將步驟(4)中高度大于4cm，葉片在4～6片，根系長度2～5cm的鴨兒芹組培苗進行煉苗，先將培養瓶的瓶蓋打開，室溫下煉苗3d后，取出試管苗，洗凈根部的培養基，移栽到準備好的基質上，保持溫度不低于10℃，不高于30℃，濕度85％～95％，適當遮陰，常規管理。

本發明所述步驟(2)中的誘導培養基為MS培養基，所述培養基內加入0.5～1.0mg/L的2，4-二氯苯氧乙酸、30g/L的蔗糖和7g/L的瓊脂粉，調節pH為5.8。

本發明所述步驟(3)中的分化培養基為MS培養基，所述培養基內加入1.5～2.0mg/L的6-芐基腺嘌呤、0.1～0.2mg/L的萘乙酸、30g/L的蔗糖和7g/L的瓊脂粉，調節pH為5.8。

本發明所述步驟(4)中的生根培養基為1/2MS培養基，所述培養基內加入0.5～1.5mg/L吲哚丁酸、30g/L蔗糖和7g/L瓊脂粉，調節pH為5.8。

本發明的優點為：本發明的方法用于鴨兒芹組織培養，克服其種子休眠期長、發芽率低等缺點，具有繁殖速度快，繁殖系數大，繁殖后代整齊一致，移栽成活率高的優點。可達到規模化生產的要求，而且能有效保持母本的優良遺傳性狀，保證了種苗的品質和質量。

具體優點為：