[發明專利]一種鴨兒芹的組織培養方法

有效

• 申請號: 201610546709.0
• 申請日: 2016-07-07
• 公開（公告）號: CN105993958B
• 公開（公告）日: 2017-11-21
• 發明（設計）人: 許陶昀;陳超;何杭鳳;陳丹萍;張平
• 申請（專利權）人: 嘉興職業技術學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 浙江永鼎律師事務所33233
• 代理人: 陸永強

1.一種鴨兒芹的組織培養方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1) 外植體消毒處理：選取生長良好的鴨兒芹一年生嫩莖，依次用洗衣粉浸泡10min，自來水沖洗3h，用75%乙醇滅菌20~40s，無菌水沖洗3~5次，再用質量濃度為1.5~3.5%的NaClO滅菌5~10min，無菌水沖洗3~5次后，用滅菌濾紙吸干表面水分，最后將消毒處理后的鴨兒芹置于無菌干凈的培養皿中備用；

(2) 愈傷組織誘導：將步驟(1)中消毒好的鴨兒芹嫩莖切成約1cm的小段，豎直插入誘導培養基中，進行暗培養30天，溫度23~25℃；

(3)分化培養：將步驟(2)中產生的愈傷組織接入分化培養基中培養6周，溫度23~25℃，光照12h/d，光照度為2000~2400lx；

(4) 生根培養：將步驟(3)中產生的叢生芽切成單株，接入生根培養基中培養，溫度23~25℃，光照12h/d，光照度為2000~2400lx，2周后，基部長出根系，長度達到2~5cm；

(5) 煉苗和移栽：將步驟(4)中高度大于4cm，葉片在4~6片，根系長度2~5cm的鴨兒芹組培苗進行煉苗，先將培養瓶的瓶蓋打開，室溫下煉苗3d后，取出試管苗，洗凈根部的培養基，移栽到準備好的基質上，保持溫度不低于10℃，不高于30℃，濕度85%~95%，適當遮陰，常規管理，

所述步驟(4)中的生根培養基為1/2MS培養基，所述培養基內加入0.5~1.5mg/L吲哚丁酸、30g/L蔗糖和7g/L瓊脂粉，調節pH為5.8，

所述步驟(2)中的誘導培養基為MS培養基，所述培養基內加入0.5~1.0mg/L 的2，4-二氯苯氧乙酸、30g/L的蔗糖和7g/L的瓊脂粉，調節pH為5.8，

所述步驟(3)中的分化培養基為MS培養基，所述培養基內加入1.5~2.0mg/L 的6-芐基腺嘌呤、0.1~0.2mg/L的萘乙酸、30g/L的蔗糖和7g/L的瓊脂粉，調節pH為5.8。