[發明專利]立達霉有關物質的測定方法

在審

• 申請號: 201610541021.3
• 申請日: 2016-07-11
• 公開（公告）號: CN107144644A
• 公開（公告）日: 2017-09-08
• 發明（設計）人: 朱鳳嬌;呂新美;胡鯤;孫晶;董亞萍;程俊茗;吳映捷;董龍香;劉思雅;范寧寧
• 申請（專利權）人: 上海海洋大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 上海卓陽知識產權代理事務所(普通合伙)31262
• 代理人: 周春洪

技術領域

本發明涉及農藥技術領域，具體地說，是立達霉有關物質的測定方法。

背景技術

高效液相色譜法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)是色譜法的一個重要分支，以液體為流動相，采用高壓輸液系統，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱中，在柱內各成分被分離后，進入檢測器進行檢測，從而實現對試樣的分析。高效液相色譜法已在化學、醫學、工業、農學、商檢、法檢等領域得到廣泛的應用。

中國專利文獻CN105223278A公開了一種固相萃取液質聯用法測定葡萄酒中甲霜靈、多菌靈的方法，包括先調節待測葡萄酒的pH值，用乙腈對酒樣進行液液萃取，加入氯化鈉待溶液鹽析后用固相萃取柱萃取乙腈層，通過固相萃取柱洗脫，收集凈化后的洗脫液，繼而轉入旋轉蒸發儀濃縮，用氮氣吹干濃縮液，通過乙腈水溶液回溶后，注入液質聯用儀進行分析，獲得葡萄酒中甲霜靈、多菌靈的含量的步驟。中國專利文獻CN104535671A公開了一種茄子中甲霜靈殘留的檢測方法，包括以下幾個步驟：(1)樣品處理：將采摘后的茄子置于破碎機中破碎，得到茄子漿；(2)提取：稱取茄子漿20g于錐形瓶中，加入100mL的乙酸乙酯和丙酮混合液，在溫度為35-40℃的條件下振蕩提取60-70min，抽濾得清液，濃縮至近干，氮吹至干，用2mL乙腈復溶備用；(3)小柱分離：用5mL乙酸乙酯洗滌HLB小柱，再用5ml丙酮洗滌小柱，上樣，用10mL體積比為1:2的乙腈和水混合液淋洗小柱，最后用10ml的乙腈洗脫，收集洗脫液，旋蒸至1ml，氮氣吹干，采用乙腈定容至2ml，待檢測；(4)檢測：采用HPLC進行檢測。但是關于本發明的立達霉有關物質的測定方法目前還未見報道。

發明內容

本發明的目的是針對現有技術中的不足，提供一種立達霉有關物質的測定方法。

為實現上述目的，本發明采取的技術方案是：一種立達霉有關物質的測定方法，所述的測定方法包括：

(1)專屬性試驗，

(2)穩定性試驗，

(3)最大的有關物質測定。

一種立達霉專屬性試驗方法，所述的試驗方法包括：

(1)酸破壞試驗：取樣品加鹽酸溶液，置熱水浴中加熱，取出后放冷，用氫氧化鈉中和，加流動相稀釋，然后進行HPLC分析；

(2)堿破壞試驗：取樣品加氫氧化鈉，置熱水浴中加熱，取出后放冷，用鹽酸中和，加流動相稀釋，然后進行HPLC分析；

(3)氧化破壞試驗：取樣品加過氧化氫，放置一段時間后取出，加流動相稀釋，然后進行HPLC分析；

(4)加熱破壞試驗：取樣品加流動相稀釋，置100℃水浴中加熱，取出后放至室溫，然后進行HPLC分析；

(5)光破壞試驗：取樣品置于紫外燈下照射，加流動相稀釋，然后進行HPLC分析。

所述的試驗方法包括：

(1)酸破壞試驗：取樣品20mg加1mol/L鹽酸溶液5mL，置熱水浴中加熱30min，取出后放冷，用1mol/L氫氧化鈉溶液中和，加流動相稀釋制成每1mL中含2mg樣品的溶液，然后進行HPLC分析；

(2)堿破壞試驗：取樣品20mg加1mol/L氫氧化鈉溶液5mL，置熱水浴中加熱30min，取出后放冷，用鹽酸中和，加流動相稀釋制成每1mL中含2mg樣品的溶液，然后進行HPLC分析；

(3)氧化破壞試驗：取樣品20mg加30％過氧化氫5mL，放置1小時后取出，加流動相稀釋制成每1mL中含2mg樣品的溶液，然后進行HPLC分析；

(4)加熱破壞試驗：取樣品加流動相稀釋制成每1mL中含2mg樣品的溶液，置100℃水浴中加熱2小時，取出后放至室溫，然后進行HPLC分析；

(5)光破壞試驗：取樣品置于紫外燈下照射24小時，稱取20mg加流動相稀釋制成每1mL中含2mg的溶液，然后進行HPLC分析。

HPLC分析的條件為：C18柱，柱溫是30℃，檢測波長225nm，流速1.5ml/min，流動相為甲醇：水＝5:95。

一種立達霉穩定性試驗方法，所述的穩定性試驗方法包括以下步驟：稱取樣品并用流動相溶解，在0-24h內在HPLC進樣分析，記錄色譜圖，以主峰峰面積考察溶液的穩定性。