[發(fā)明專利]9-羥基-3-異吩惡嗪酮在基質(zhì)輔助激光解吸電離中的用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610480131.3
• 申請日: 2016-06-27
• 公開（公告）號: CN107543860B
• 公開（公告）日: 2019-10-15
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 熊彩僑;聶宗秀;王繼云;黃熹;劉會會
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院化學(xué)研究所
• 主分類號: G01N27/64
• 分類號: G01N27/64
• 代理公司: 北京清亦華知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11201
• 代理人: 李志東

本發(fā)明提出了9?羥基?3?異吩惡嗪酮在基質(zhì)輔助激光解吸電離中的用途以及測定待測顆粒質(zhì)量的方法。9?羥基?3?異吩惡嗪酮的酸性很弱，對顆粒樣品無腐蝕，并且，其最大吸收波長在可見光處，很多大分子在可見光區(qū)域吸收很弱，從而能有效降低激光引起的樣品激發(fā)及破碎。9?羥基?3?異吩惡嗪酮用于基質(zhì)輔助激光解吸電離，可實現(xiàn)完整顆粒，尤其是大顆粒或細(xì)胞等沒有堅硬外殼的生物顆粒的高效解吸和電離。本發(fā)明實施例所提出的測定待測顆粒質(zhì)量的方法從技術(shù)上克服了常用有機小分子基質(zhì)無法保持細(xì)胞等沒有堅硬外殼顆粒完整性的缺陷，且本發(fā)明實施例所采用的基質(zhì)，背景干擾小，解吸電離效率高，適用于多種無機、有機和生物顆粒的質(zhì)量分析和測定。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及檢測領(lǐng)域，具體地，本發(fā)明涉及9-羥基-3-異吩惡嗪酮在基質(zhì)輔助激光解吸電離中的用途，更具體地，本發(fā)明涉及9-羥基-3-異吩惡嗪酮在基質(zhì)輔助激光解吸電離中的用途以及測定待測顆粒質(zhì)量的方法。

背景技術(shù)

顆粒是一種廣泛存在的基本物質(zhì)形式，如生物領(lǐng)域的病毒、細(xì)菌、細(xì)胞等，環(huán)境中的粉塵、氣溶膠等，材料中的多種微米、納米顆粒，藥物中的微膠囊、納米藥物和藥物載體等。這些顆粒在生物醫(yī)藥、環(huán)境及材料科學(xué)等領(lǐng)域發(fā)揮著重要的作用，因此對這些顆粒的表征至關(guān)重要。顆粒的質(zhì)量是顆粒表征的一個重要的物理參數(shù)，其能夠綜合反映顆粒的體積及密度信息。另外，相比于容易隨外界壓力條件而變化的體積及密度而言，顆粒的質(zhì)量能更準(zhǔn)確的實現(xiàn)顆粒種類的區(qū)分和鑒定以及顆粒聚集和生長過程的表征。

離子阱質(zhì)譜是實現(xiàn)顆粒質(zhì)量測定的一種有效方法。相比于傳統(tǒng)的重量分析或流式細(xì)胞而言，其具有操作簡單、測定準(zhǔn)確等優(yōu)勢。在離子阱質(zhì)譜中，帶電顆粒被囚禁于阱中心。隨著頻率的掃描，不穩(wěn)定的顆粒依次拋出阱外并被電荷檢測器所探測，從而實現(xiàn)顆粒的質(zhì)量分析。顆粒離子的質(zhì)荷比m/Z和帶電量Z可分別根據(jù)拋出頻率及電荷檢測器的信號強度計算獲得。通過對上百個顆粒質(zhì)量的統(tǒng)計分析，從而獲得其平均質(zhì)量和質(zhì)量分布。利用離子阱質(zhì)譜，人們已成功地實現(xiàn)了多種顆粒的測量。根據(jù)所測得的質(zhì)量，實現(xiàn)了顆粒表面吸附量等的測定。

然而，利用離子阱質(zhì)譜實現(xiàn)顆粒質(zhì)量測定仍需要進(jìn)一步的開發(fā)和改進(jìn)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明是基于發(fā)明人對以下問題和事實的發(fā)現(xiàn)而提出的：

在進(jìn)行質(zhì)譜之前，利用基質(zhì)輔助激光解吸電離(MALDI)源進(jìn)行顆粒解吸電離，然而，目前的MALDI仍然不能實現(xiàn)細(xì)胞等沒有堅硬外殼的生物顆粒的分析。發(fā)明人研究發(fā)現(xiàn)，這是由于在目前MALDI解吸中，所用的基質(zhì)如3-羥基吡啶羧酸(3HPA)、芥子酸(SA)、α-氰基-4-羥基肉桂酸(4HCCA)和2-(4-羥基-偶氮苯)-苯甲酸(HABA)為酸性，在與顆?；旌系倪^程中很容易引起顆粒的破碎；另外，上述的酸性基質(zhì)的吸收波長在紫外波段，顆粒對紫外光的吸收以及激光對顆粒的轟擊也會對顆粒的完整性產(chǎn)生破壞。

針對上述問題，發(fā)明人提出了一種以9-羥基-3-異吩惡嗪酮為基質(zhì)的可見光MALDI新方法，該方法可用于實現(xiàn)完整顆粒的高效解吸和電離。

在本發(fā)明的第一方面，本發(fā)明提出了9-羥基-3-異吩惡嗪酮在基質(zhì)輔助激光解吸電離中的用途。發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，9-羥基-3-異吩惡嗪酮的酸性很弱，對顆粒樣品無腐蝕，并且，其最大吸收波長在可見光處，很多大分子在可見光區(qū)域吸收很弱，從而能有效降低激光引起的樣品激發(fā)及破碎。9-羥基-3-異吩惡嗪酮用于基質(zhì)輔助激光解吸電離，可實現(xiàn)完整顆粒，尤其是大顆粒、細(xì)胞等沒有堅硬外殼的生物顆粒的高效解吸和電離。

在本發(fā)明的第二方面，本發(fā)明提出了一種測定待測顆粒質(zhì)量的方法。根據(jù)本發(fā)明的實施例，所述方法包括：將待測顆粒與9-羥基-3-異吩惡嗪酮接觸；將接觸后產(chǎn)物進(jìn)行基質(zhì)輔助激光解吸電離和離子阱質(zhì)譜分析；以及基于離子阱質(zhì)譜圖，確定待測顆粒的質(zhì)量。本發(fā)明實施例所提出的方法從技術(shù)上克服了常用有機小分子基質(zhì)無法保持細(xì)胞等沒有堅硬外殼顆粒完整性的缺陷，且本發(fā)明實施例所采用的基質(zhì)，背景干擾小，解吸電離效率高，適用于多種無機、有機和生物顆粒的質(zhì)量分析和測定。