[發明專利]一種褐色喜熱裂孢菌發酵生產幾丁質酶的方法

在審

• 申請號: 201610374195.5
• 申請日: 2016-05-30
• 公開（公告）號: CN105779421A
• 公開（公告）日: 2016-07-20
• 發明（設計）人: 鄧禹;張曉娟;趙梅;劉曉迪
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C12N9/42
• 分類號: C12N9/42;C12R1/01
• 代理公司: 南京禹為知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 32272
• 代理人: 王曉東

1.一種褐色喜熱裂孢菌發酵生產幾丁質酶的方法，其特征在于：包括，

二級種子液培養：將所述褐色喜熱裂孢菌在加富培養基中50～55℃、200～240 r/min條件下培養20～24h，制得一級種子液，以2～3％的接種量將一級種子液轉 接在加富培養基中，在50～55℃、200～240r/min條件下培養20～24h制得二級種 子液；

幾丁質酶的制得：以2～3％的接種量將二級種子液接入發酵培養基中，在 50～55℃、200～240r/min條件下培養50～54h，得到幾丁質酶產品。

2.如權利要求1所述的褐色喜熱裂孢菌發酵生產幾丁質酶的方法，其特征 在于：所述加富培養基以質量百分比計，包括，NaCl1.00～1.40％、(NH₄) ₂SO₄2.40～2.60％、KH₂PO₄0.65～0.80％、Na₂HPO₄7.00～7.50％、EDTA0.01～0.03％、 MgSO₄·7H₂O0.05～0.10％、FeSO₄·7H₂O0.005～0.010％、MnSO₄·7H₂O0.005～0.007％、 CaCl₂·2H₂O0.003～0.007％、生物素0.00007～0.00010％、硫銨素0.00007～0.00010％、 酵母粉0.010～0.020％。

3.如權利要求2所述的褐色喜熱裂孢菌發酵生產幾丁質酶的方法，其特征 在于：所述加富培養基，其碳源包括纖維二糖、葡萄糖或木聚糖中的一種或幾 種。

4.如權利要求1～3中任一項所述的褐色喜熱裂孢菌發酵生產幾丁質酶的方 法，其特征在于：所述加富培養基，其pH為6.0～8.0。

5.如權利要求1所述的褐色喜熱裂孢菌發酵生產幾丁質酶的方法，其特征 在于：所述發酵培養基以質量百分比計，包括，NaCl1.00～1.40％、(NH₄) ₂SO₄2.40～2.60％、KH₂PO₄0.65～0.80％、Na₂HPO₄7.00～7.50％、EDTA0.01～0.03％、 MgSO₄·7H₂O0.05～0.10％、FeSO₄·7H₂O0.005～0.010％、MnSO₄·7H₂O0.005～0.007％、 CaCl₂·2H₂O0.003～0.007％、生物素0.00007～0.00010％、硫銨素0.00007～0.00010％、 酵母粉0.010～0.020％。

6.如權利要求5所述的褐色喜熱裂孢菌發酵生產幾丁質酶的方法，其特征 在于：所述發酵培養基，其碳源包括纖維二糖、幾丁質、葡萄糖或木聚糖中的 一種或幾種。

7.如權利要求1、5、6中任一項所述的褐色喜熱裂孢菌發酵生產幾丁質酶 的方法，其特征在于：所述發酵培養基，其pH為6.0～8.0。

8.如權利要求6所述的褐色喜熱裂孢菌發酵生產幾丁質酶的方法，其特征 在于：所述碳源為幾丁質，且幾丁質的含量為5g/L。

9.如權利要求8所述的褐色喜熱裂孢菌發酵生產幾丁質酶的方法，其特征 在于：所述幾丁質酶產品發揮最佳作用時的pH為5.0～7.0，且50～55℃仍具有酶 活。

10.如權利要求1、8、9中任一項所述的褐色喜熱裂孢菌生產幾丁質酶的方 法，其特征在于：所述幾丁質酶產品最佳反應時間為5～10min。