[發明專利]一種硬脂酸修飾的細胞穿膜肽及其制備與應用

在審

• 申請號: 201610369973.1
• 申請日: 2016-05-30
• 公開（公告）號: CN107446016A
• 公開（公告）日: 2017-12-08
• 發明（設計）人: 徐宇虹;李秩舉;彭金良;魏曉慧;陳曉龍
• 申請（專利權）人: 上海交通大學
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C07K7/08;C07K14/00;C07K19/00;A61K9/127;A61K47/28;A61K38/08;A61K38/10;A61K38/16
• 代理公司: 上海光華專利事務所(普通合伙)31219
• 代理人: 李艷,許亦琳

技術領域

本發明屬于生物藥物研發領域，具體涉及一種硬脂酸修飾的細胞穿膜肽及其制備與應用。

背景技術

大部分的多肽藥物的治療靶點都在細胞內，比如細胞質，細胞核或者其他特殊的細胞器如線粒體等，因此，把具有生物活性的多肽輸送到細胞內是多肽類藥物發揮藥效的關鍵所在。在多肽藥物的輸送過程中，存在很多的局限性。首先多肽本身的大分子量使得多肽對于受體生物來說是外來物，除了一些小分子多肽通過主動轉運進入細胞外，親脂性的生物膜也阻礙著多肽分子自發進入細胞。雖然有些多肽可以通過受體介導的細胞內吞作用進入細胞，但是進入細胞的多肽最終被溶酶體吞噬，多肽的生物活性被溶酶體內的酶破壞，這樣就導致僅有很少一部分的多肽可以進入細胞質發揮作用，所以有很多的多肽雖然在體外有很好的作用，卻由于生物利用度問題無法應用于體內。另外多肽藥物在體內也不穩定，各種各樣的體內因素均會導致多肽的失活：溫度，PH，高鹽濃度，或者表面活性影響其活性，非共價離子化合物、低分子或者高分子化合物也影響多肽的結構等等。由于多肽的半衰期短，不斷的注射給藥使病人的順應性差，多肽本身的物化性質和低的滲透性也限制了其通過非侵襲性的鼻腔、皮膚、肺和口服的給藥途徑[3]的應用。多肽藥物的細胞內輸送過程中存在著一系列的難點，因此在多肽藥物的研發過程中，尋找合適的輸送載體來提高多肽的生物利用度至關重要。

發明內容

為了克服現有技術中所存在的問題，本發明的目的在于提供一種硬脂酸修飾的細胞穿膜肽及其制備與應用。

為了實現上述目的以及其他相關目的，本發明采用如下技術方案：

本發明的第一方面，提供了一種硬脂酸修飾的細胞穿膜肽，包括硬脂酸和細胞穿膜肽，所述硬脂酸修飾于細胞穿膜肽上。

優選地，所述硬脂酸與細胞穿膜肽之間通過酰胺鍵連接。

優選地，所述硬脂酸修飾的細胞穿膜肽為CPP-SA，所述CPP的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，硬脂酸SA修飾于所述CPP的C端。

進一步優選地，硬脂酸SA的羧基與所述CPP的C端的賴氨酸的側鏈氨基連接。

進一步優選地，硬脂酸修飾的細胞穿膜肽CPP-SA的結構式如式(1)所示，具體為：

優選地，所述硬脂酸修飾的細胞穿膜肽為CPP-MMP-SA，所述CPP-MMP的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，硬脂酸SA修飾于所述CPP-MMP的C端。

進一步優選地，硬脂酸SA的羧基與所述CPP-MMP的C端的賴氨酸的側鏈氨基連接。

進一步優選地，硬脂酸修飾的細胞穿膜肽CPP-MMP-SA的結構式如式(2)所示，具體為：

優選地，所述硬脂酸修飾的細胞穿膜肽為GGGSK-SA，硬脂酸SA修飾于所述GGGSK的C端。

進一步優選地，硬脂酸SA的羧基與所述GGGSK的C端的賴氨酸的側鏈氨基連接。

進一步優選地，硬脂酸修飾的細胞穿膜肽GGGSK-SA的結構式如式(3)所示，具體為：

本發明的第二方面，提供了前述硬脂酸修飾的細胞穿膜肽在輸送多肽進入細胞中的用途。

本發明的第三方面，提供了前述硬脂酸修飾的細胞穿膜肽在制備融合肽中的用途。

本發明的第四方面，提供一種融合肽，包括多肽和前述硬脂酸修飾的細胞穿膜肽，所述多肽的C端與所述硬脂酸修飾的細胞穿膜肽的N端連接。

優選地，所述多肽的C端與硬脂酸修飾的細胞穿膜肽的N端通過酰胺鍵連接。

本發明對于多肽沒有特別的限制。優選地，所述多肽含有1～50個氨基酸。

本發明的第五方面，提供一種脂質體制劑，含有前述融合肽和脂質體載體。

優選地，融合肽與脂質體之間的摩爾比例范圍是1:(1～10)。