[發明專利]基因輸送載體及其制備與應用

在審

• 申請號: 201610367835.X
• 申請日: 2016-05-30
• 公開（公告）號: CN107441506A
• 公開（公告）日: 2017-12-08
• 發明（設計）人: 徐宇虹;張琰;曹婧;魏曉慧;許風偉;魏爽
• 申請（專利權）人: 上海交通大學
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;A61K47/22;A61K47/16;A61K47/18
• 代理公司: 上海光華專利事務所(普通合伙)31219
• 代理人: 李艷,許亦琳

1.一種基因輸送載體，包括中性脂質、輔助脂質、陽離子脂質、基因藥物。

2.根據權利要求1所述的基因輸送載體，其特征在于，所述基因輸送載體還包括靶向分子。

3.根據權利要求2所述的基因輸送載體，其特征在于，所述靶向分子與陽離子脂質的摩爾比例范圍是1:(3～240)。

4.根據權利要求1～3任一權利要求所述的基因輸送載體，其特征在于，所述中性脂質、輔助脂質、陽離子脂質之間的摩爾比例范圍是：(5～40)：(30～50)：(30～55)。

5.根據權利要求1～3任一權利要求所述的基因輸送載體，其特征在于，所述輔助脂質選自膽固醇和中鏈脂肪酸。

6.根據權利要求1～3任一權利要求所述的基因輸送載體，其特征在于，所述陽離子脂質的pKa的范圍是小于7.0。

7.根據權利要求1～3任一權利要求所述的基因輸送載體，其特征在于，所述陽離子脂質包括4.0<pKa<7.0的陽離子脂質，所述4.0<pKa<7.0的陽離子脂質占陽離子脂質總數的摩爾比例范圍是(5～90)％。

8.根據權利要求1～3任一權利要求所述的基因輸送載體，其特征在于，所述陽離子脂質與基因藥物之間的N/P比范圍是(1～10)：1。

9.根據權利要求1～8任一權利要求所述的基因輸送載體，其特征在于，所述基因輸送載體還包括聚乙二醇化脂質PEG-lipids。

10.根據權利要求9所述的基因輸送載體，其特征在于，所述PEG-lipids與陽離子脂質之間的摩爾比例范圍是1：(3～110)。

11.根據權利要求9所述的基因輸送載體，其特征在于，所述PEG-lipids中PEG的分子量范圍是200～5000。

12.根據權利要求9～11任一權利要求所述的基因輸送載體，其特征在于，所述PEG-lipids與靶向分子與之間的摩爾比例范圍是所述PEG-lipids與所述靶向分子與之間的摩爾比例范圍是(1～80)：1。

13.如權利要求12所述的基因輸送載體的制備方法，選自以下方法之任一，

方法一、包括步驟：

(1)按配比取中性脂質、輔助脂質、陽離子脂質、PEG-lipids、DSPE-PEG2000-Maleimide的乙醇儲備液，混合，將混合后的混合脂質乙醇溶液注入緩沖溶液中，得空白陽離子脂質體；

(2)按照陽離子脂質與基因藥物的N/P比，將基因藥物注入到步驟(1)所得空白陽離子脂質體中，得脂質體-基因復合物；

(3)將步驟(2)所得脂質體-基因復合物，于緩沖液中透析，去除乙醇，得脂質體-基因復合物；

(4)活化靶向分子中的巰基，然后將巰基活化后的靶向分子與步驟(3)所得脂質體-基因復合物混合，反應，得包括靶向分子的基因輸送載體。

方法二、包括步驟：

(1)按配比取中性脂質、輔助脂質、陽離子脂質、PEG-lipids的乙醇儲備液，混合，將混合后的混合脂質乙醇溶液注入緩沖溶液中，得空白陽離子脂質體；

(2)按照陽離子脂質與基因藥物的N/P比，將基因藥物注入到步驟(1)所得空白陽離子脂質體中，得脂質體-基因復合物；

(3)將步驟(2)所得脂質體-基因復合物，于緩沖液中透析，去除乙醇，得脂質體-基因復合物；

(4)取一定量的DSPE-PEG(2000)Maleimide加緩沖液超聲，得膠束；

(5)活化靶向分子中的巰基，然后將巰基活化后的靶向分子與步驟(4)所得膠束混合，反應，得靶向分子與DSPE-PEG2000-Maleimide的連接產物；

(6)將步驟(5)中的連接產物按一定比例與步驟(3)中所得脂質-基因復合物孵育，得包括靶向分子的基因輸送載體。