[發明專利]心肌炎的蛋白標志物的用途

在審

• 申請號: 201610361889.5
• 申請日: 2016-05-26
• 公開（公告）號: CN107436321A
• 公開（公告）日: 2017-12-05
• 發明（設計）人: 高友鶴;趙敏迪;李遜斗
• 申請（專利權）人: 北京師范大學
• 主分類號: G01N27/62
• 分類號: G01N27/62
• 代理公司: 北京戈程知識產權代理有限公司11314
• 代理人: 程偉

技術領域

本發明涉及心肌炎的蛋白標志物的用途。具體而言，本發明涉及利用自身免疫性心肌炎大鼠模型和質譜分析獲得的人心肌炎診斷相關的蛋白標志物的用途。

背景技術

尿蛋白質組學在腎臟疾病研究中的意義：

不同于血液有維持內環境穩態的能力，尿液更容易產生變化，這些變化反映身體機能的改變，即尿液是生物標志物的重要來源，參見Youhe G.Can urine be the gold mine for biomarker discovery？.Sci China Life Sci 2013；43.。

尿液常可以在一定程度表現出泌尿系統的功能，利用尿液變化診斷腎臟疾病方便簡單。泌尿系統功能變化不易察覺，目前診斷方法主要依賴于活組織檢查，使早期診斷、早期治療、提高治愈率十分困難。尿蛋白質組主要由通過腎小球濾過的血漿蛋白質和腎臟、泌尿道分泌蛋白質共同組成，所以腎臟和泌尿道功能的變化可以通過尿蛋白質組反映出來，其高敏感性使之成為尋找泌尿系統損傷的生物標志物的重要方法。尿液作為腎臟的主要輸出物，在反映腎臟狀況方面具有得天獨厚的優勢，并且可以很容易大量地、無創性地獲得，因此尿檢常被稱為體外的腎活檢，在臨床上具有重要的診斷意義。

心肌炎，是心肌的炎癥性損傷。炎癥可能是由于自身免疫反應、寄生蟲、細菌或者病毒感染引起，參見Caforio AL,Pankuweit S et al.Current state of knowledge on aetiology,diagnosis,management,and therapy of myocarditis:A position statement of the european society of cardiology working group on myocardial and pericardial diseases.European heart journal 2013；34:2636-48,48a-48d.。心肌炎主要發生在16-19歲青少年，臨床表現多樣化，從幾乎沒有任何癥狀體征的左心室收縮功能障礙到病毒感染和免疫細胞攻擊引起的嚴重的心律失常、心肌損傷甚至心源性休克，參見Fung G,Luo H,Qiu Y,Yang D,McManus B.Myocarditis.Circulation research 2016；118:496-514.。目前診斷方法主要依賴于患者感染史、心電圖以及心臟影像學表現，但是由于其臨床表現的復雜性，使心肌炎的正確診斷有很大挑戰。

肌球蛋白誘導的自身免疫性心肌炎(Experimental autoimmune myocarditis，EAM)是心肌炎癥損傷的經典動物模型。它是由T細胞介導的自身免疫性疾病，異源肌球蛋白誘導機體產生針對心臟的抗體，這些抗體與機體內心肌結合，從而對心肌造成破壞，引起心肌的炎癥反應和細胞壞死，參見Leuschner F,Katus HA,Kaya Z.Autoimmune myocarditis:Past,present and future.Journal of autoimmunity 2009；33:282-9。自身免疫性心肌炎的急性期和亞急性期，心臟的收縮功能減弱，舒張期延長，每搏輸出量降低，心臟功能嚴重受損。自身免疫性心肌炎在過去的研究中提供了大量關于免疫系統在心肌炎、擴張性心肌病和心力衰竭中的作用的信息。

發明內容

因此，本發明的技術目的在于利用自身免疫性心肌炎大鼠模型和質譜分析獲得的人心肌炎早期病程中相關的尿蛋白標志物，以利用其檢測受試者健康狀態、監測心肌炎疾病嚴重程度以及治療進程和/或評估疾病預后。

換言之，本研究結合蛋白質組學技術和動物模型，研究心肌炎病情相關的生物標志物，用于心肌炎的診斷，治療過程中的監測，和預后評價。本發明發現了一系列用于心肌炎診斷、治療過程中檢測和預后評估的蛋白生物標志物。

本發明為了尋找到人心肌炎早期診斷相關的蛋白標志物，利用自身免疫性心肌炎動物模型，獲得實驗動物尿液，利用質譜技術對疾病早期中的尿蛋白組進行鑒定，獲得心肌炎診斷相關蛋白。對所獲得的蛋白質組數據經過嚴格的生物信息學分析，獲得能夠用于心肌炎診斷、治療過程中檢測和預后評估的蛋白生物標志物。

本發明發現與人心肌炎病情嚴重程度相關的尿蛋白標志物，其中未被報道的以蛋白UniProt號顯示為40個。