[發明專利]基于化學發光法檢測MUC?16含量的試劑盒

在審

• 申請號: 201610345349.8
• 申請日: 2016-05-23
• 公開（公告）號: CN106610430A
• 公開（公告）日: 2017-05-03
• 發明（設計）人: 李翀;李書成;林開栗;張勇;康星;楊文杰
• 申請（專利權）人: 天津億美諾生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574;G01N33/543;G01N21/76
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.化學發光法檢測MUC-16含量的試劑盒包括抗異硫氰酸熒光素多克隆抗體包被的磁微粒、異硫氰酸熒光素標記的MUC-16單克隆抗體、堿性磷酸酶標記的MUC-16單克隆抗體、堿性磷酸酶催化發光的化學發光底物液、稀釋液、清洗液、MUC-16系列校準品，其中，本發明的試劑盒的反應試管的材料選自透明的聚苯乙烯、聚乙烯和聚丙烯中的至少一種。

2.根據權利要求1所述，化學發光法檢測MUC-16含量的試劑盒，其特征在于，所述的抗異硫氰酸熒光素多克隆抗體包被的磁微粒由羧基修飾的磁微粒表面共價結合抗異硫氰酸熒光素多克隆抗體制備得到，其中，所述的磁微粒粒徑為0.7～3μm，內核為四氧化三鐵表面包裹有羧基基團。在實際的免疫檢測中，由于待測樣品中所含的雜質成分較多，一定程度上影響了檢測靈敏度和準確性，所以從復雜的待測樣品基質中快速分離、純化出目的待測物是臨床檢驗工作者面臨的難題之一。磁微粒免疫檢測技術是利用高分子材料合成一定粒度大小的磁性固相微粒作載體，以物理吸附、化學偶聯等方法包被上具有特異性親和力的抗體或抗原等各種免疫活性物質，具有分離速度快、效率高、可重復性好、操作簡單、不影響被分離細胞或其他生物材料的生物學性狀和功能等特點，在外加磁場作用下可定向運動，使得某些特殊成分得以分離、濃集或純化。

3.根據權利要求1所述，化學發光法檢測MUC-16含量的試劑盒，其特征在于，所述的抗異硫氰酸熒光素多克隆抗體包被的磁微粒懸浮于所述稀釋液中，配制成0.5～2μg/mL的磁微粒溶液；所述異硫氰酸熒光素標記的MUC-16單克隆抗體溶解在所述稀釋液中，分別配制成0.25～0.5μg/mL異硫氰酸熒光素標記的MUC-16單克隆抗體溶液；所述堿性磷酸酶標記的MUC-16單克隆抗體溶解在所述稀釋液中，分別配制成0.25～0.5μg/mL堿性磷酸酶標記的MUC-16單克隆抗體溶液。

4.根據權利要求1所述，化學發光法檢測MUC-16含量的試劑盒，其特征在于，所述的異硫氰酸熒光素標記的MUC-16單克隆抗體溶液通過透析法制備得到。

5.根據權利要求1所述，化學發光法檢測MUC-16含量的試劑盒，其特征在于，所述的堿性磷酸酶標記的MUC-16單克隆抗體通過分別活化MUC-16單克隆抗體、堿性磷酸酶溶液后，將活化后的MUC-16單克隆抗體與活化后的堿性磷酸酶溶液混合后得到。

6.根據權利要求1所述，化學發光法檢測MUC-16含量的試劑盒，其特征在于，所述的化學發光底物液為0.1～0.3M、pH值為8～10的Tris-HCl緩沖液，所述Tris-HCl緩沖液含有0.2～0.4mg/mL的二氧雜環乙烷，更優選地，所述Tris-HCl緩沖液含有0.3mg/mL的二氧雜環乙烷。

7.根據權利要求1所述，化學發光法檢測MUC-16含量的試劑盒，其特征在于，所述的稀釋液為0.05～0.5M、pH值為7.0～8.0的Tris-HCl緩沖液且所述稀釋液含0.4～0.6wt％的牛血清白蛋白BSA和0.05～0.3wt％的疊氮化鈉；所述的清洗液為0.1～0.2M、pH值為8～9的Tris-HCl緩沖液，所述Tris-HCl緩沖液含有0.01～0.04wt％的吐溫20和15～20wt％的氯化鈉，更優選地，所述的清洗液為0.1M、pH值為8Tris-HCl緩沖液中加入質量百分比為0.02％的吐溫20和15％的氯化鈉。

8.根據權利要求1所述，化學發光法檢測MUC-16含量的試劑盒，其特征在于，所述的MUC-16系列校準品的濃度范圍為0～50ng/mL。