[發明專利]一種動物皮脫細胞基質敷料的制備方法以及所得的敷料

在審

• 申請號: 201610341204.0
• 申請日: 2016-05-20
• 公開（公告）號: CN107397972A
• 公開（公告）日: 2017-11-28
• 發明（設計）人: 張國強;柳軼男;楊新廣;董驤
• 申請（專利權）人: 北京納通科技集團有限公司
• 主分類號: A61L15/40
• 分類號: A61L15/40;A61L15/42
• 代理公司: 北京律智知識產權代理有限公司11438
• 代理人: 王瑩,于寶慶

1.一種動物皮脫細胞基質敷料的制備方法，將動物皮的斷層皮片經過病毒滅活步驟、脫脂步驟、脫毛步驟以及脫細胞步驟制得，其特征在于，所述脫細胞步驟包括多次凍融步驟以及所述多次凍融步驟之后的脫細胞溶液脫細胞步驟，其中，所述凍融步驟中，冷凍溫度為-70℃～-90℃，冷凍時間為5～15小時；所述脫細胞溶液脫細胞步驟中，所述脫細胞溶液包含質量濃度為0.01％～0.2％的胰酶、質量濃度為0.1％～1.0％的硫酸銨以及質量濃度為0.01％～0.2％的脫脂劑，所述斷層皮片與所述脫細胞溶液的質量比為1:6～1:10。

2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述脫細胞溶液包含質量濃度為0.01％～0.09％的胰酶、質量濃度為0.5％～1.0％的硫酸銨以及質量濃度為0.05％～0.15％的脫脂劑；所述斷層皮片浸泡于所述脫細胞溶液中10～60分鐘。

3.根據權利要求1或2所述的制備方法，其特征在于，所述脫脂劑選自平平加、Triton X-100、十二烷基氨基丙酸鈉、脂肪醇聚氧乙烯醚中的一種。

4.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述多次凍融步驟于所述病毒滅活步驟之前進行，或穿插于所述病毒滅活步驟、脫脂步驟、脫毛步驟之間進行。

5.根據權利要求1-4任一項所述的制備方法，其特征在于，所述病毒滅活步驟為將所述斷層皮片置于病毒滅活溶液中浸泡10～60分鐘，所述斷層皮片與所述病毒滅活溶液的質量比為1:6～1:10，所述病毒滅活溶液包含質量濃度為0.01％～0.2％的過氧乙酸和質量濃度為0.1％～1.0％的氯化鈉，優選地，所述病毒滅活溶液包含質量濃度為0.01％～0.07％的過氧乙酸和質量濃度為0.1％～0.5％的氯化鈉。

6.根據權利要求1-4任一項所述的制備方法，其特征在于，所述脫脂步驟為將所述斷層皮片置于脫脂溶液中10～60分鐘，所述斷層皮片與所述脫脂溶液的質量比為1:6～1:10，所述脫脂溶液包含質量濃度為 0.1％～1.0％的純堿、質量濃度為0.1％～1.0％的燒堿以及質量濃度為0.01％～0.2％的脫脂劑，優選地，所述脫脂溶液包含質量濃度為0.1％～0.5％的純堿、質量濃度為0.1％～0.7％的燒堿以及質量濃度為0.01％～0.07％的脫脂劑；其中，所述脫脂劑選自平平加、Triton X-100、十二烷基氨基丙酸鈉、脂肪醇聚氧乙烯醚中的一種。

7.根據權利要求1-4任一項所述的制備方法，其特征在于，所述脫毛步驟為將所述斷層皮片置于質量濃度為1.5％～6.0％的Na₂S溶液中10～60分鐘，所述斷層皮片與所述脫脂溶液的質量比為1:6～1:10，優選地，所述Na₂S溶液的質量濃度為1.5％～3.0％。

8.根據權利要求1-7任一項所述的制備方法，其特征在于，當所述斷層皮片包含表皮層時，所述制備方法還包括去除表皮步驟，其為將所述斷層皮片置于質量濃度為1.0％～5.0％的醋酸溶液中10～30分鐘；優選地，所述去除表皮步驟在所述多次凍融步驟之后進行。

9.根據權利要求1-8任一項所述的制備方法，其特征在于，所述制備方法還包括去除DNA/RNA步驟，其為將所述斷層皮片置于DNA酶溶液和RNA酶溶液中浸泡20～60分鐘。

10.根據權利要求1-9任一項所述的制備方法，其特征在于，所述制備方法在所述脫細胞步驟之后還包括冷凍干燥步驟以及滅菌步驟，其中，所述滅菌步驟采用劑量為15～30KGy/h的⁶⁰Co輻照滅菌。

11.一種動物皮脫細胞基質敷料，其特征在于，采用權利要求1-10任一項所述制備方法制得。