[發(fā)明專利]一種美國(guó)紅楓快速繁殖的方法有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201610339561.3 | 申請(qǐng)日: | 2016-05-20 |
| 公開(公告)號(hào): | CN105918128B | 公開(公告)日: | 2018-02-06 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 戴勤;王冬梅;李慧珍 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 蕪湖歐標(biāo)農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司 |
| 主分類號(hào): | A01H4/00 | 分類號(hào): | A01H4/00 |
| 代理公司: | 北京科億知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙)11350 | 代理人: | 湯東鳳 |
| 地址: | 241000 安徽省蕪*** | 國(guó)省代碼: | 安徽;34 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 美國(guó) 快速 繁殖 方法 | ||
1.一種美國(guó)紅楓快速繁殖的方法,其特征在于所述的方法包括以下步驟:
1)外植體的選取:取當(dāng)年生直徑2-5mm的美國(guó)紅楓莖尖或帶腋芽的莖段為外植體,剪去葉片后將外植體剪成1-3cm長(zhǎng)以備用;
2)外植體消毒:將上述莖段放入盛有自來水的20-25KHz超聲波清洗機(jī)中保持溫度30-35℃處理30-45min,然后以自來水沖洗10-20min;隨后在超凈工作臺(tái)上以70-75%的酒精消毒25-35秒,0.1%升汞溶液中處理5-8分鐘,然后以無菌水沖洗4-5遍,置于無菌培養(yǎng)皿備用;
3)初始誘導(dǎo)培養(yǎng):將滅菌后外植體各剪去2-3mm,外植體按末端向下插入初始誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng),培養(yǎng)條件為光強(qiáng)1800-2500Lx、光周期10-14h/d,溫度25℃±2℃;培養(yǎng)4-6d后將其中未污染的外植體莖段轉(zhuǎn)接到新的初始誘導(dǎo)培養(yǎng)基中,并繼續(xù)培養(yǎng)12-18d至新芽長(zhǎng)出;所述的初始誘導(dǎo)培養(yǎng)基組成分為:WPM+6-BA0.5-1.0mg/L+NAA0.1-0.5mg/L+PVP1-5mg/L;
4)愈傷組織誘導(dǎo):取初始誘導(dǎo)培養(yǎng)中的芽,放入愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)15-20d,條件為暗培養(yǎng),溫度23℃±2℃;所述愈傷組織培養(yǎng)基為:WPM+6-BA1.0-2.0mg/L+NAA0.1-0.5mg/L+PVP1-5mg/L;
5)增殖培養(yǎng):將透明無色的愈傷組織塊放入增殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)20-25d,增殖產(chǎn)生大量叢生苗,培養(yǎng)條件為光強(qiáng)1800-2500Lx、光周期10-14h/d,溫度25℃±2℃;所述增殖培養(yǎng)用培養(yǎng)基為:
1/2MS+6-BA0.5-1.0mg/L+NAA0.1-0.5mg/L+PVP 1-5mg/L;
6)生根培養(yǎng):將5)步驟中的叢生苗切割成單個(gè),轉(zhuǎn)移至生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)15-20d后生根,培養(yǎng)條件為光強(qiáng)2500-3500Lx、光周期10-14h/d,溫度25℃±2℃;所述生根用培養(yǎng)基為:1/2MS+IBA0.1-0.5mg/L+PVP1-5mg/L;
7)煉苗和移栽:將有生根的美國(guó)紅楓幼苗的培養(yǎng)基瓶蓋打開,室溫下煉苗3-5d后,取出幼苗,洗去根部培養(yǎng)基,移栽裝有河沙基質(zhì)的苗床上,保持溫度20-25℃,濕度70%-85%,適當(dāng)遮蔭即可;
所述的6-BA為6-芐氨基嘌呤;
所述的NAA為α-萘乙酸;
所述的IBA為吲哚-3-丁酸;
所述的PVP為聚乙烯吡咯烷酮。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種美國(guó)紅楓快速繁殖的方法,其特征在于所述步驟3)中初始誘導(dǎo)培養(yǎng)基組成為:WPM+6-BA0.8mg/L+NAA0.2mg/L+PVP2mg/L。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種美國(guó)紅楓快速繁殖的方法,其特征在于所述步驟4)中愈傷組織培養(yǎng)基為:WPM+6-BA 1.6mg/L+NAA0.3mg/L+PVP3mg/L。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種美國(guó)紅楓快速繁殖的方法,其特征在于所述步驟5)中增殖培養(yǎng)用培養(yǎng)基為:1/2MS+6-BA0.8mg/L+NAA0.2mg/L+PVP 3mg/L。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種美國(guó)紅楓快速繁殖的方法,其特征在于所述步驟6)中生根用培養(yǎng)基為:1/2MS+IBA0.3mg/L+PVP2mg/L。
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