[發明專利]GBA基因L444P突變檢測試劑盒

在審

• 申請號: 201610332857.2
• 申請日: 2016-05-19
• 公開（公告）號: CN105755166A
• 公開（公告）日: 2016-07-13
• 發明（設計）人: 謝勇壯;郭奇偉;鐘力;許華曦;卜國軍;曹甜甜
• 申請（專利權）人: 廈門人瑞生物醫藥科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 廈門南強之路專利事務所(普通合伙) 35200
• 代理人: 馬應森

1.GBA基因L444P突變檢測試劑盒，其特征在于包括引物、熒光探針和試劑；

所述引物用于擴增包含GBA基因444位點的DNA片段，其堿基序列如SEQIDNO：1和SEQIDNO：2，引物序列由其堿基互補序列替換；

所述熒光探針用于識別GBA基因L444P突變；所述熒光探針5’端標記熒光基團，3’端標記淬滅基團；所述熒光探針采用兩種不同熒光基團標記的核酸探針在一個反應管內同時指示三種基因型，其堿基序列如SEQIDNO：3和SEQIDNO：4所述探針序列可由其堿基互補序列替換；

所述試劑包括MgCl₂、熱啟動Taq酶、UNG酶、dATP、dCTP、dGTP、dTTP、dUTP和PCR反應緩沖液。

2.如權利要求1所述GBA基因L444P突變檢測試劑盒，其特征在于所述兩種不同熒光基團包括任意發射波長不同的兩種熒光基團的組合，常用的熒光基團包括但不局限于現有的各種熒光標記物，常用的淬滅基團包括但不局限于現有的各種淬滅劑。

3.如權利要求2所述GBA基因L444P突變檢測試劑盒，其特征在于所述現有的各種熒光標記物選自ALEX-350、FAM、HEX、VIC、TET、JOE、ROX、TEXASRED、CY3、CY5、CY5.5中的一種。

4.如權利要求2所述GBA基因L444P突變檢測試劑盒，其特征在于所述現有的各種淬滅劑選自DABCYL、BHQ1、BHQ2、BHQ3、TAMRA、ECLIPE中的一種。

5.如權利要求1所述GBA基因L444P突變檢測試劑盒，其特征在于所述熒光探針包括但不局限于TaqMan探針、TaqMan-MGB探針、分子信標、改良分子信標、雙鏈熒光置換探針、LightCycler探針、雙環探針中的至少一種。

6.如權利要求1所述GBA基因L444P突變檢測試劑盒，其特征在于所述MgCl₂的摩爾濃度為1～5mmol/L，所述dATP、dCTP、dGTP、dTTP的摩爾濃度均為50～400μmol/L，dUTP的摩爾濃度為10～1000μmol/L。

7.如權利要求1所述GBA基因L444P突變檢測試劑盒，其特征在于所述熱啟動Taq酶的單位為1～3U/反應。

8.如權利要求1所述GBA基因L444P突變檢測試劑盒，其特征在于所述UNG酶的用量為0.1～1U/反應。