[發(fā)明專(zhuān)利]一種短葶山麥冬甾體皂苷化合物及其制備方法和應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610328147.2
• 申請(qǐng)日: 2016-05-17
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN107383155A
• 公開(kāi)（公告）日: 2017-11-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 余伯陽(yáng);李永偉;戚進(jìn);寇俊萍;周水平;李瑞明;何毅;錢(qián)長(zhǎng)敏
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 天士力制藥集團(tuán)股份有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C07J71/00
• 分類(lèi)號(hào): C07J71/00;A61K31/7048;A61P35/00;A61P15/14
• 代理公司: 北京華科聯(lián)合專(zhuān)利事務(wù)所(普通合伙)11130
• 代理人: 王為

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及從短葶山麥冬地下部位中提取分離的一種prazerigenin型甾體皂苷新化合物、制備方法及在抗腫瘤方面的用途。

背景技術(shù)

短葶山麥冬為百合科(Lilaceae)山麥冬屬(Liriope)植物短葶山麥冬Liriope muscari(Decne)Baily的干燥塊根，是《中國(guó)藥典》一部“山麥冬”項(xiàng)下收載的常用中藥。具有養(yǎng)陰潤(rùn)肺，益胃生津的功效，可用于肺燥干咳，陰虛癆嗽，喉痹咽痛，津傷口渴，內(nèi)熱消渴，心煩失眠，腸燥便秘”，廣泛用于心血管系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)疾病及糖尿病等疾病的治療。藥理實(shí)驗(yàn)表明，短葶山麥冬藥材可以顯著延長(zhǎng)小鼠存活時(shí)間、極顯著增加小鼠的脾臟重量、顯著增強(qiáng)小鼠的碳粒廓清作用。

短葶山麥冬中主要含甾體皂苷類(lèi)、萜類(lèi)、酰胺生物堿類(lèi)、脂肪酸類(lèi)等化合物，其中甾體皂苷是其主要生物活性成分。藥理作用表明，短葶山麥冬藥材中分離所得的甾體皂苷類(lèi)化合物DT-13為其主要活性成分。

甾體皂苷類(lèi)化合物DT-13(Liriope muscari baily saponins C)，又名短葶山麥冬皂苷C、山奈酚-7-O-葡萄糖苷，其結(jié)構(gòu)式見(jiàn)式A,臨床上用于抑制肺癌、乳腺癌、黑色素瘤等腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移，同時(shí)，研究其作用機(jī)理是通過(guò)與蛋白NMMHC IIA結(jié)合，調(diào)節(jié)腫瘤轉(zhuǎn)移過(guò)程中的多種關(guān)鍵分子，進(jìn)而抑制腫瘤。

長(zhǎng)期以來(lái)，在市場(chǎng)上，尤其是在福建省泉州市，惠安，仙游等地將短葶山麥冬作為麥冬Ophiopogon japonicus的替代品使用。而國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)該植物化學(xué)成分研究報(bào)道甚少，僅有的文獻(xiàn)大部分集中在發(fā)明人所在的研究小組對(duì)其成分的研究上，經(jīng)過(guò)大量的研究發(fā)明人意外的發(fā)現(xiàn)一類(lèi)新的prazerigenin型甾體皂苷新化合物。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供從短葶山麥冬地下部位中分離出的一種prazerigenin型甾體皂苷新化合物，由短葶山麥冬地下部位經(jīng)粗提、大孔樹(shù)脂吸附、反復(fù)萃取、硅膠柱層析、Spheladex LH-20柱層析、高壓液相色譜儀分離所得的一種prazerigenin型甾體皂苷元母核類(lèi)新化合物，活性研究證明該化合物具有抗腫瘤作用。

本發(fā)明提供一種具有式Ⅰ結(jié)構(gòu)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，

本發(fā)明進(jìn)一步提供該化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的制備方法，所述方法包括以下步驟：將短葶山麥冬地下部位粗提，然后大孔樹(shù)脂吸附、反復(fù)萃取、硅膠柱層析、Spheladex LH-20柱層析、高壓液相色譜儀分離，即得。

優(yōu)選的，本發(fā)明所述的方法，包括以下步驟：

1)稱(chēng)取短葶山麥冬地下部位，加入乙醇，回流提取，過(guò)濾，合并濾液，減壓回收乙醇，備用；

2)將藥液過(guò)大孔樹(shù)脂吸附,并用水或低濃度乙醇除雜，高濃度乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓回收乙醇，備用；

3)將步驟2)中所得藥液用乙酸乙酯多次萃取，然后用正丁醇多次萃取，將萃取液分別濃縮至浸膏，分別獲得乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物；

4)將步驟3)得到的正丁醇萃取物用硅膠柱色譜分離，用氯仿-甲醇進(jìn)行梯度洗脫，收集I2至I8部分洗脫液，用薄層色譜進(jìn)行檢測(cè)，顯色，合并相同部分，濃縮至干，備用；

5)將硅膠柱層析I2至I8部分分別用凝膠Sephadex LH-20進(jìn)行柱層析，用氯仿-甲醇進(jìn)行洗脫除雜，分別收集所得洗脫液，減壓回收濃縮至干得II2至II8，備用；

6)將II7部分以RP-18為填料，用高壓液相色譜儀分離進(jìn)行純化，得上述新化合物。

其中，所述步驟1)中，乙醇的濃度為50-75％。

其中，所述步驟2)中，所用大孔樹(shù)脂為D101型；低濃度乙醇的濃度為20-30％；高濃度乙醇的濃度為50-75％。

其中，所述步驟3)中，乙酸乙酯的用量與藥液的體積比為1:1～3：1；正丁醇的用量與藥液的體積比為1:1～3：1。

其中，所述步驟4)中，氯仿和甲醇的體積比為10:1，9:1，8:2，7:3，6:4，5:5，4:6，3:7，2:8；

其中，所述步驟5)中，氯仿和甲醇的體積比為1-3：1-3；

其中，所述步驟6)中，將II7部分以RP-18為填料，用高壓液相色譜儀分離純化是以甲醇-水為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫。

更優(yōu)選的，本發(fā)明所述方法包括以下步驟：