[發明專利]一種脂肪酶催化在線合成5′-O-乙烯己二酰尿苷的方法

有效

• 申請號: 201610326588.9
• 申請日: 2016-05-17
• 公開（公告）號: CN107384991B
• 公開（公告）日: 2020-11-13
• 發明（設計）人: 杜理華;成柄灼;徐亮亮;羅錫平
• 申請（專利權）人: 浙江工業大學
• 主分類號: C12P19/38
• 分類號: C12P19/38;C12M1/40;C12M1/00
• 代理公司: 杭州天正專利事務所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;俞慧

1.一種脂肪酶催化在線合成5'-O-乙烯己二酰尿苷的方法，其特征在于：所述方法采用微流控通道反應器，所述的微流控通道反應器包括注射泵、注射器、反應通道和產物收集器，所述注射器安裝于注射泵中，通過一個接口與反應通道入口連接，所述產物收集器通過一個接口與反應通道出口連接，所述反應通道內徑為0.8～2.4mm，反應通道長為0.5～1.0m；所述方法包括：以體積比為1:8～16的二甲亞砜和叔戊醇為反應溶劑，以摩爾比為1:5～13的尿苷與己二酸二乙烯酯為原料，以0.5～1.0g脂肪酶Lipozyme TLIM為催化劑，將原料和反應溶劑置于注射器中，將脂肪酶Lipozyme TLIM均勻填充在反應通道中，在注射泵的推動下使原料和反應溶劑連續通入反應通道中進行酰化反應，使反應體系中尿苷的濃度為0.03～0.07mmol/mL，控制酰化反應溫度為15～50℃，酰化反應時間為20～35min，通過產物收集器在線收集反應液，反應液經后處理得5'-O-乙烯己二酰尿苷。

2.如權利要求1所述的脂肪酶催化在線合成5'-O-乙烯己二酰尿苷的方法，其特征在于：所述的方法包括下列步驟：先用一定量的二甲亞砜溶解尿苷，再加叔戊醇至一定體積，裝于注射器中備用；用叔戊醇溶解己二酸二乙烯酯至一定體積，裝于另一注射器中備用；然后在注射泵推動下使原料和反應溶劑通入反應通道中進行反應。

3.如權利要求1所述的脂肪酶催化在線合成5'-O-乙烯己二酰尿苷的方法，其特征在于：所述微流控通道反應器包括恒溫箱，所述反應通道置于恒溫箱中。

4.如權利要求2所述的脂肪酶催化在線合成5'-O-乙烯己二酰尿苷的方法，其特征在于：所述微流控通道反應器包括恒溫箱，所述反應通道置于恒溫箱中。

5.如權利要求1～4之一所述的脂肪酶催化在線合成5'-O-乙烯己二酰尿苷的方法，其特征在于：所述反應體系中二甲亞砜與叔戊醇的體積比為1:12～16，所述尿苷與己二酸二乙烯酯的摩爾比為1:7～13，反應體系中尿苷的濃度為0.04～0.06mmol/mL，所述酰化反應溫度為20～40℃，所述酰化反應時間為25～35min。

6.如權利要求5所述的脂肪酶催化在線合成5'-O-乙烯己二酰尿苷的方法，其特征在于：所述尿苷與己二酸二乙烯酯的摩爾比為1:9～11。

7.如權利要求6所述的脂肪酶催化在線合成5'-O-乙烯己二酰尿苷的方法，其特征在于：所述反應體系中二甲亞砜與叔戊醇的體積比為1:14，所述尿苷與己二酸二乙烯酯的摩爾比為1:9，反應體系中尿苷的濃度為0.05mmol/mL，所述酰化反應溫度為30℃，所述酰化反應時間為30min。