[發明專利]同步快速檢測配制酒中8種人工合成著色劑的LC-MS/MS方法有效

申請號：	201610309435.3	申請日：	2016-05-11
公開（公告）號：	CN105954413B	公開（公告）日：	2018-05-04
發明（設計）人：	鄭新華;王樂;韓煥美;張景然	申請（專利權）人：	濟南出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術中心
主分類號：	G01N30/02	分類號：	G01N30/02;G01N30/06
代理公司：	濟南誠智商標專利事務所有限公司37105	代理人：	韓百翠
地址：	250014 山東***	國省代碼：	山東;37
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摘要：
搜索關鍵詞：	同步快速檢測配制人工合成著色 lc ms 方法
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【說明書】：

技術領域

本發明涉及一種同步快速檢測配制酒中多種人工合成著色劑的方法，具體涉及一種可同時對配制酒中8種人工合成著色劑進行提取、凈化、定量測定的固相萃取/LC-MS/MS方法。

背景技術

人工合成著色劑是通過化學合成的方法生產的有機色素，主要以苯、甲苯、萘等芳烴類化工產品為原料，經過磺化、鹵化、偶氮化等一系列有機反應化合而成。其成本低廉、色澤鮮艷、著色力強、性能穩定，在食品生產加工行業中被廣泛應用。但人工合成著色劑大多為偶氮類化合物，過量食用可對人體有致畸致癌作用。近年來，為了加強對食用合成著色劑的管理，許多國家對食用合成色素的理化性質及安全性做了深入細致的研究，明確限定了食用合成色素的使用品種、使用范圍及使用量。美國嚴禁在加工食品中使用偶氮玉紅、羅丹明B、喹啉黃、萘酚黃、酸性紫6B和亮黑等，允許使用靛藍、新紅；歐盟嚴禁使用新紅、羅丹明B、萘酚黃和酸性紫6B，允許使用靛藍、偶氮玉紅、喹啉黃、亮黑，但有限量要求；我國GB2760-2014《食品安全國家標準食品添加劑使用標準》對靛藍、新紅、偶氮玉紅、喹啉黃的使用也有嚴格的限量要求，羅丹明B、萘酚黃、亮黑和酸性6B紫則嚴禁使用。

目前，國內外用于食品中多種合成著色劑的檢測方法主要有分光光度法、高效液相色譜法、高效液相串聯質譜法等。分光光度法操作繁瑣、定性定量準確度較差。液相色譜法是目前應用最廣泛的檢測方法，但是缺乏配套的確證技術，無法滿足復雜的食品基質中目標物的定性確證要求。已報道的檢測食品中合成著色劑的LC-MS/MS方法，只涉及單一系列著色劑且無普適的前處理凈化手段。因此，建立一種同時提取、凈化、同步快速定量檢測配制酒中新紅、靛藍、酸性紫6B、羅丹明B、酸性紅、喹啉黃、萘酚黃和亮黑8種人工合成著色劑的方法變得尤為重要。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術的不足，提供一種同步快速檢測配制酒中8種人工合成著色劑的LC-MS/MS方法。該方法同步提取、一次過柱萃取凈化、一次色譜過程定量分析配制酒中的8種人工合成著色劑，包括新紅、靛藍、酸性紫6B、羅丹明B、酸性紅、喹啉黃、萘酚黃和亮黑。該方法操作簡單、靈敏度高、重現性好、準確率高。

本發明所采用的技術方案為：一種同步快速檢測配制酒中8種人工合成著色劑的LC-MS/MS方法，其特征是，

所述的8種人工合成著色劑為新紅、靛藍、酸性紫6B、羅丹明B、酸性紅、喹啉黃、萘酚黃和亮黑；

具體包括以下步驟：

(1)制備：取配制酒樣品，加熱除去乙醇，加入超純水，用檸檬酸水溶液調試pH值至3-6，得待凈化溶液；

(2)凈化：

a、同時萃取8種人工合成著色劑的固相萃取小柱的組裝：取40-60μm陽離子交換填料和40-60μm陰離子交換填料，填充于底端為聚乙烯篩板的聚丙烯小柱內，填料上端再以聚乙烯篩板固定；

b、柱活化：將上述固相萃取小柱依次用pH值6-7的水、甲醇活化；

c、加樣淋洗：轉移上述待凈化液至固相萃取小柱，依次用pH值3-6的水、甲醇淋洗SPE柱；

d、洗脫：低真空吹干SPE柱，用3％-6％的氨化甲醇洗脫待分析成分并接收，收集液于50℃氮氣吹干，加水溶解，渦流混合后過0.22μm濾膜，供LC-MS/MS分析；

(3)檢測：步驟(2)得到的待測樣品用液相色譜-串聯四級桿質譜進行測定。

優選的，具體包括以下步驟：

(1)制備：取配制酒樣品于燒杯中緩緩加熱至70℃攪拌除去乙醇，密封標識，待用；稱取樣品10g于25mL容量瓶中，加入10mL超純水，用檸檬酸水溶液調試pH值至3-6，超純水定容得待凈化溶液；