[發(fā)明專利]一種規(guī)?；a(chǎn)康百汀的工藝及獲得的高純度康百汀

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610293538.5
• 申請(qǐng)日: 2016-05-05
• 公開（公告）號(hào): CN105907808B
• 公開（公告）日: 2017-06-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 黃智勇;徐會(huì)根;羅定軍;陳繼敏;李耀榮;熊志;葉家雄
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣東藍(lán)寶制藥有限公司
• 主分類號(hào): C12P17/06
• 分類號(hào): C12P17/06;C07D309/30;C12R1/80
• 代理公司: 北京精金石專利代理事務(wù)所(普通合伙)11470
• 代理人: 劉曄

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種規(guī)模化生產(chǎn)康百汀的工藝及獲得的高純度康百汀。

背景技術(shù)

康百汀又稱為美伐他汀，是一種真菌的次生代謝產(chǎn)物，屬HMG-COA還原酶抑制劑，其作用是競爭性抑制HMG-CoA還原酶，該酶是膽固醇生物合成的限速酶?？蛋偻∮?976年由AkiraEndo從真菌PenicilliumCitrinum發(fā)現(xiàn)，并于1976年由A.G.Brown從Penicillium brvicompactum中單獨(dú)分離出來，其分子式為C₂₃H₂₄O₅，分子量為390.52。

康百汀可以有效的降低體內(nèi)的膽固醇，其衍生物普伐他汀在降低膽固醇方面具有更強(qiáng)的藥性。康百汀可以通過其結(jié)構(gòu)某個(gè)特定碳的羥基化轉(zhuǎn)化為普伐他汀，即康百汀可以作為普伐他汀生產(chǎn)的中間體或初始材料。作為普伐他汀的前體或原料，康百汀的質(zhì)量和產(chǎn)量直接影響轉(zhuǎn)化菌的轉(zhuǎn)化效率和普伐他汀的純度。因此，研究和開發(fā)高質(zhì)量和產(chǎn)量的康百汀生產(chǎn)工藝是仍是目前研究的重點(diǎn)。

劉家勤發(fā)表了一篇題目為“美伐他汀搖瓶培養(yǎng)基的優(yōu)化初探”的論文，該論文研究表明：當(dāng)培養(yǎng)基的配方為葡萄糖66g/L、麥芽糖37g/L、豆粕15g/L、玉米漿13g/L、硫酸銨1.3g/L、甘油40g/L、聚氧化丙烯聚氧化乙烯甘油醚2.5g/L、飲用水適量時(shí)，發(fā)酵菌種的發(fā)酵單位可以提高75％。

徐蓉等發(fā)表了一篇題目為“桔青霉產(chǎn)美伐他汀發(fā)酵條件優(yōu)化和小罐放大”的論文，該論文研究了不同碳、氮源，無機(jī)鹽，初始pH值和接種量等因素對(duì)桔青霉HD-32-2產(chǎn)美伐他汀生產(chǎn)能力的影響，該論文著重對(duì)4種發(fā)酵培養(yǎng)基組分進(jìn)行正交試驗(yàn)，形成最優(yōu)的發(fā)酵培養(yǎng)基為葡萄糖80g/L、麥芽糖20g/L、黃豆餅粉11g/L和磷酸氫二鉀5g/L，其余與初始培養(yǎng)基相同，優(yōu)化后的發(fā)酵培養(yǎng)比初始培養(yǎng)的發(fā)酵水平提高了3倍。

李敏發(fā)表了一篇題目為“美伐他汀提取工藝研究”的論文，該論文公開了干法和濕法浸提兩種美伐他汀的提取工藝。干法提取美伐他汀的步驟為發(fā)酵液用稀酸處理后過濾，濕菌絲通過氣流干燥，干燥方式有進(jìn)風(fēng)140℃氣流干燥、進(jìn)風(fēng)80℃氣流干燥和進(jìn)風(fēng)160℃閃蒸三種，美伐他汀的環(huán)化在氣流干燥的同時(shí)完成，干燥后的菌渣(含水量低于5％)用于萃取等后續(xù)的工藝。干法提取美伐他汀所獲得的美伐他汀粗品收率僅為60％。而濕法浸提提取美伐他汀的步驟為發(fā)酵液中的菌絲經(jīng)過濾得到后，用乙酸丁酯，浸提4小時(shí)，浸提比例為1∶7；第二次浸提時(shí)間為2小時(shí)，物料比為1∶4；提取濃縮液真空減壓蒸餾的方式進(jìn)行，生產(chǎn)過程中適宜的閉環(huán)溫度為70-80℃，時(shí)間為6小時(shí)。通過實(shí)驗(yàn)確定浸提的最佳溶劑、最佳條件，所獲得的美伐他汀粗品收率為70％。

因此，研究和開發(fā)高產(chǎn)量和高純度、適合規(guī)?；a(chǎn)的康百汀生產(chǎn)工藝仍是目前研究的重點(diǎn)。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決現(xiàn)有技術(shù)中康百汀生產(chǎn)工藝存在的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種生產(chǎn)成本低、高產(chǎn)量、高純度和適合規(guī)模化生產(chǎn)的一種規(guī)?；a(chǎn)康百汀的工藝，以解決上述缺陷。

本發(fā)明提供了一種規(guī)?；a(chǎn)康百汀的工藝，包括以下步驟：

S1將純種桔青霉接種于種子培養(yǎng)基中進(jìn)行種子培養(yǎng)，然后接種在發(fā)酵培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，得發(fā)酵液；

S2往步驟S1中得到的發(fā)酵液中加入上述發(fā)酵液總重量2-8％的硅藻土，過濾，收集濾餅；加入上述濾餅6-10倍量的乙酸丁酯在30-50℃下萃取，過濾，得濾液；

S3往步驟S2得到的濾液中加入上述濾液重量1-3倍活性炭，攪拌1-2h，過濾，將濾液加熱至90-120℃，反應(yīng)6-12h后，將濾液在40-80℃下真空濃縮體積至1/4-3/4后，溫度降至5-10℃結(jié)晶6-10h，過濾，將晶體在60-70℃下干燥至干燥失重≤1％，得康百汀粗品；

S4往步驟S3得到的康百汀粗品中加入上述康百汀粗品2-4倍的丙酮溶液溶解，活性炭脫色，降溫結(jié)晶，即得；

所述種子培養(yǎng)基主要由以下組分組成：白砂糖45-55g/L、甘油30-50g/L、KH₂PO₄ 1-3g/L、MgSO₄·7H₂O 1-2g/L、維生素溶液0.1-0.4ml/L，水加至1L；