[發明專利]一種混合基質兩階段液體發酵制備功能紅曲產品的方法

在審

• 申請號: 201610271629.9
• 申請日: 2016-04-28
• 公開（公告）號: CN105755048A
• 公開（公告）日: 2016-07-13
• 發明（設計）人: 劉斌;童愛均;呂旭聰;趙超;曾峰
• 申請（專利權）人: 福建農林大學
• 主分類號: C12P1/02
• 分類號: C12P1/02;A23L33/00;C12R1/66
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學俊

技術領域

本發明屬于微生物發酵領域，涉及一種混合基質兩階段液體發酵制備功能紅曲產品的方法。

背景技術

紅曲中具有多種生理活性的次級代謝物質（紅曲色素、MonacolinK、γ-氨基丁酸等），具有健脾健胃、活血化瘀、抑菌、抗氧化、降血脂、抗老年癡呆和抗癌的等多種生理功效。在食品或醫藥行業，紅曲品種很多，大都以谷物為原料制備的，如大米、大豆、小米、玉米、木薯、菠蘿蜜籽等谷物（穆洪霞等，紅曲霉發酵不同底物產色素的研究進展.中國釀造,Vol.33,No.1,2014.）。

桔霉素是紅曲菌的次級代謝產物，被證實其具有腎毒性，能夠引起腎臟腫大，腎小管擴張和上皮細胞壞死，還可致畸致癌。實驗證明紅曲菌產桔霉素是普遍性的問題。常規紅曲米的制備方法是利用紅曲菌發酵大米而成，紅曲菌在發酵大米的過程中會代謝桔霉素，因此，紅曲存在桔霉素含量過高的困擾。

桔霉素的污染對消費者的健康構成了危害。在“2000東方紅曲國際研討會”上來自日本的報告，采用這一標準測定了3個來自中國的紅曲色素樣品，結果桔霉素全部超標。美國FDA明確提出紅曲產品作為食品添加劑必須對桔霉素進行評價，Heber等使用酶聯免疫法檢測了9種作為營養補充劑的中國紅曲制品，發現7種含有桔霉素。我國紅曲中桔霉素含量很難達到控制標準，桔霉素問題成為限制我國紅曲出口的瓶頸問題。

申請號201110364139.0為薏米紅曲的制備方法，主要是以薏米為原料，接入紅曲曲種，經發酵過程而得。制備步驟主要有液態紅曲曲種制備，薏米原料制備，接種，發酵培養和成品制備。

申請號200910164002.3的紅曲山藥的制作方法，是有關于一種紅曲山藥的制作方法，將新鮮山藥清潔干凈，并切成2～20mm大小的碎塊干燥，接著進行滅菌，滅菌完待冷卻后，將一紅曲菌種接菌至該山藥中，在30℃、60%濕度下培養10天，最后將培養完成的紅曲山藥進行干燥。眾多學者對紅曲單一基質液體發酵的研究很多，但是在混合基質兩階段液體發酵方面卻鮮有研究。

發明內容

本發明的目的在于針對現有技術不足，提供一種混合基質兩階段液體發酵制備功能紅曲產品的方法。所制備的功能紅曲產品功能性成分含量高，桔霉素含量低，具有豐富的營養價值和突出的醫療保健作用。

為實現上述目的，本發明采用如下技術方案：

以紅曲霉菌或土曲霉為出發菌株，經液體發酵培養基制備、液體菌種制備、兩階段液體發酵和發酵產物濃縮干燥步驟獲得功能紅曲，所述兩階段液體發酵分為第一階段高溫液體發酵和第二階段低溫液體發酵，第一階段高溫液體發酵溫度為25-40℃，第二階段低溫液體發酵溫度相對第一階段降低5-10℃，為15-30℃，具體包括以下步驟：

1）液體發酵培養基的制備：按質量百分比計，A類物質5-10%、B類物質5-10%、KH₂PO₄0.01-0.5%、MgSO₄·7H₂O0.01-0.5%、ZnSO₄·7H₂O0.01-0.5%，水78.5-89.97%，各組分質量百分比之和為100%；A類和B類物質浸泡2-10小時后，磨成漿，加入培養基剩余成分混合均勻，調pH值為3-6，滅菌；

2）液體菌種制備：紅曲霉菌或土曲霉菌種接種PDA培養基，25-35℃活化培養5-8天，加入無菌生理鹽水洗脫，獲得孢子懸液；將孢子懸液轉接入裝有液體發酵培養基的瓶或罐中進行擴大培養得到液體菌種；培養條件為：接種量5-15%（v/v），培養溫度20-40℃，培養時間2-7天；

3）兩階段液體發酵：將步驟2）得到的液體菌種懸液接到液體發酵培養基中進行液體發酵，接種量5-15%（v/v），第一階段高溫液體發酵溫度為25-40℃，發酵時間為5-10天；第二階段低溫液體發酵溫度相對第一階段降低5-10℃，為15-30℃，培養時間為5-15天；

4）發酵產物濃縮干燥：將發酵得到的終產物在50-65℃條件下蒸發濃縮至浸膏狀后將其烘干至恒重，得到功能紅曲粉；

5）采用現有技術將功能紅曲粉制成紅曲休閑食品、顆粒劑、膠囊、片劑（咀嚼片）等產品。

所述的A類物質為花生、黃豆、薏仁、紅豆、蓮子、小米、玉米粒、大米、紅米、黑米、糯米、栗子、綠豆、小麥、大麥仁、蕓豆、豇豆、紅豆、蠶豆和黑豆中的一種或幾種；所述的B類物質為苦蕎麥、蘆筍、棗、蓮子心、茶葉提取物、山楂、槐米和杏仁中的一種或幾種。