[發明專利]利用截短柔性殘基提高普魯蘭酶催化性能的方法

有效

• 申請號: 201610259979.3
• 申請日: 2016-04-25
• 公開（公告）號: CN105734034B
• 公開（公告）日: 2019-05-10
• 發明（設計）人: 聶堯;徐巖
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C12N9/44
• 分類號: C12N9/44;C12N15/56;C12N15/63;C12N1/21;C12N1/19
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211
• 代理人: 耿曉岳

1.一種普魯蘭酶突變體，其特征在于，所述突變體的氨基酸序列相對于Bacillusnaganoensis 來源的普魯蘭酶的氨基酸序列，發生了N端前5個、22個、45個、64個、78個或106個氨基酸的截短或C端最后9個或最后36個氨基酸的截短；所述Bacillus naganoensis來源的普魯蘭酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。

2.根據權利要求1所述的突變體，其特征在于，所述Bacillus naganoensis 來源的普魯蘭酶的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。

3.編碼權利要求1-2任一所述突變體的核苷酸片段。

4.含有編碼權利要求1-2任一所述突變體的基因的載體。

5.表達權利要求1-2任一所述突變體的基因工程菌。

6.根據權利要求5所述的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌為大腸桿菌、酵母或枯草芽孢桿菌。

7.權利要求1-2任一所述突變體在食品、化工或紡織領域的應用。

8.一種提高普魯蘭酶底物親和力的方法，其特征在于，所述方法是對Bacillusnaganoensis來源的普魯蘭酶進行氨基酸截短；所述方法是指去掉Bacillus naganoensis來源的普魯蘭酶的氨基酸序列的N端的前5、22、45、64、78或106位的氨基酸，或者是去除C端的后9或36位氨基酸；所述Bacillus naganoensis 來源的普魯蘭酶的氨基酸序列如SEQ IDNO:1所示。

9.一種同時提高普魯蘭酶的酶活、比活力、催化效率和底物親和性的方法，其特征在于，所述方法是對Bacillus naganoensis來源的普魯蘭酶進行氨基酸截短；所述方法是去掉Bacillus naganoensis來源的普魯蘭酶的氨基酸序列的N端的前5個氨基酸或者N端的前106個氨基酸；所述Bacillus naganoensis 來源的普魯蘭酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。

10.一種提高普魯蘭酶的熱穩定性的方法，其特征在于，所述方法是對Bacillusnaganoensis來源的普魯蘭酶進行氨基酸截短；所述方法是去掉Bacillus naganoensis來源的普魯蘭酶的氨基酸序列的C端的后9個氨基酸；所述Bacillus naganoensis 來源的普魯蘭酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。

11.一種同時提高普魯蘭酶的熱穩定性和催化效率的方法，其特征在于，所述方法是對Bacillus naganoensis來源的普魯蘭酶進行氨基酸截短；所述方法是去掉Bacillusnaganoensis來源的普魯蘭酶的氨基酸序列的N端的前78個氨基酸；所述Bacillusnaganoensis 來源的普魯蘭酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。

12.一種提高普魯蘭酶的催化效率的方法，其特征在于，所述方法是對Bacillusnaganoensis來源的普魯蘭酶進行氨基酸截短；所述方法是去掉Bacillus naganoensis來源的普魯蘭酶的氨基酸序列的N端的前45個氨基酸；所述Bacillus naganoensis 來源的普魯蘭酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。