[發明專利]HPLC測定銀馬解毒顆粒中綠原酸和甘草酸銨含量的方法

有效

• 申請號: 201610259335.4
• 申請日: 2016-04-25
• 公開（公告）號: CN105784890B
• 公開（公告）日: 2018-02-16
• 發明（設計）人: 陳學松;孫良廣;林冬杰;廖強;歐妮
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區梧州食品藥品檢驗所
• 主分類號: G01N30/74
• 分類號: G01N30/74;G01N30/86;G01N30/08
• 代理公司: 廣州市越秀區海心聯合專利代理事務所(普通合伙)44295
• 代理人: 黃為,蔡國

技術領域

本發明提供一種測定銀馬解毒顆粒中綠原酸和甘草酸銨含量的方法，具體地說，是一種HPLC測定銀馬解毒顆粒中綠原酸和甘草酸銨含量的方法；屬于化學檢測技術領域。

背景技術

銀馬解毒顆粒是由金銀花、馬齒莧、車前草、大黃、甘草等組成的純中藥制劑。具有清熱解毒，止咳祛痰的功效，用于熱邪犯肺所致的肺熱咳嗽等證，現代醫學的急性支氣管炎或慢性支氣管炎急性發作期出現上述癥候者亦適用。該藥用于臨床已多年，療效較好。

發明內容

針對上述不足，本發明的目的是提供一種測量更準確，檢測靈敏度更高的HPLC測定銀馬解毒顆粒中綠原酸和甘草酸銨含量的方法。

為解決上述技術問題，本發明提供的技術方案如下：

一種HPLC測定銀馬解毒顆粒中綠原酸和甘草酸銨含量的方法，該方法依次包括下述步驟：準確稱取樣品1g置于10mL萃取池中，用甲醇對樣品在溫度60℃，靜態提取3min，重復提取2次，提取完成后將提取液用甲醇定容至20mL，吸取1mL于離心管中，漩渦離心2min，取上清液注入高效液相色譜儀；

所述的色譜條件如下：

色譜柱：StableBond SB-苯基柱；

流動相：甲醇A－0.5％甲酸水溶液B；

流動相A為甲醇，流動相B為0.5％甲酸水溶液；

進樣量為6μl；

梯度洗脫程序：0～5min，80％A、20％B；5～15min，85％～15％A、15％～85％B；15～25min，50％A、50％B；再在50％A、50％B下平衡10min；

流速1.0mL/min；

波長為300nm；

柱溫：30℃。

進一步的，上述的HPLC測定銀馬解毒顆粒中綠原酸和甘草酸銨含量的方法，所述的高效液相色譜儀為安捷倫Agilent-1200。

進一步的，上述的HPLC測定銀馬解毒顆粒中綠原酸和甘草酸銨含量的方法，所述的色譜柱規格：250mm×4.6mm，5μm。

與現有技術相比，本發明提供的技術方案采用反相HPLC法梯度洗脫，測定銀馬解毒顆粒中的綠原酸、甘草酸銨的含量，方法簡便、快捷、檢測結果可靠，可以作為該產品質量控制的方法。

具體實施方式

下面結合具體實施方式，對本發明的權利要求做進一步的詳細說明，但不構成對本發明的任何限制，任何在本發明權利要求保護范圍所做的有限次的修改，仍在本發明的權利要求保護范圍之內。

本發明所涉及的到百分含量濃度，除特殊說明外，溶質為液體的均為體積濃度，溶質為固體的均為質量濃度。

實施例1

一種HPLC測定銀馬解毒顆粒中綠原酸和甘草酸銨含量的方法，該方法依次包括下述步驟：準確稱取樣品1g置于10mLASE350萃取池中，用甲醇對樣品在溫度60℃，靜態提取3min，重復提取2次，提取完成后將提取液用甲醇定容至20mL，吸取1mL于離心管中，漩渦離心2min，取上清液注入安捷倫Agilent-1200高效液相色譜儀；

所述的色譜條件如下：

色譜柱：StableBond SB-苯基柱(250mm×4.6mm，5μm)；檢測波長220nm；

流動相：甲醇A－0.5％甲酸水溶液B；

流動相A為甲醇，流動相B為0.5％甲酸水溶液；梯度洗脫程序：0～5min，80％A、20％B；5～15min，85％～15％A、15％～85％B；15～25min，50％A、50％B；再在50％A、50％B下平衡10min；

流速1.0mL/min；

波長為300nm；

柱溫：30℃。

為了驗證本法明提供的技術方案，分別取缺金銀花、甘草樣品按供試品溶液制備缺金銀花陰性對照溶液及缺甘草陰性對照溶液，在同樣的色譜條件下進行檢測，發現陰性對照試驗無干擾。

分別精密稱取綠原酸16.64mg、甘草酸銨5.05mg置同一100ml容量瓶中，加50％甲醇至刻度，搖勻，即得對照品溶液。

綠原酸濃度為166.4μg/ml、甘草酸銨濃度為50.5μg/ml的對照品溶液按擬訂的色譜條件分別進樣分別吸取上述對照品溶液3μl、5μl、10μl、20μl、30μl，注入色譜儀，測定，以峰面積積分值為縱坐標(Y)，對照品進樣量(ng)為橫坐標(X)繪制標準曲線，得綠原酸的回歸方程為：Y＝2665.1X+185.6(r＝0.9996)；甘草酸銨的回歸方程為：Y＝626.1X+0.6(r＝0.9999)。