[發明專利]利用玻璃化超低溫離體保存扁桃休眠芽的方法有效
| 申請號: | 201610258196.3 | 申請日: | 2016-04-23 |
| 公開(公告)號: | CN105746496B | 公開(公告)日: | 2018-06-01 |
| 發明(設計)人: | 姜喜;于軍;焦培培;陳加利;趙書珍;黨艷青;徐冰冰 | 申請(專利權)人: | 塔里木大學 |
| 主分類號: | A01N3/00 | 分類號: | A01N3/00 |
| 代理公司: | 武漢宇晨專利事務所 42001 | 代理人: | 張紅兵 |
| 地址: | 843300 新疆維吾爾自*** | 國省代碼: | 新疆;65 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 扁桃 休眠芽 超低溫 玻璃化液 離體保存 玻璃化 洗滌液 預處理液 培養基 裝載 培養液 植物組織培養技術 生長培養基 果樹栽培 植株 暗培養 水浴鍋 葉原基 液氮罐 預培養 裝載液 剝取 放入 莖尖 吸干 卸載 成活率 光照 恢復 取出 保存 新鮮 健康 | ||
1.一種利用玻璃化超低溫方法離體保存扁桃樹休眠芽的方法,其特征在于下列步驟:
(1)從休眠期健康扁桃樹一年生枝條上剝取含有1-2個葉原基的0.6~1.5mm休眠芽的莖尖,放入預處理液中預培養1d;
(2)在室溫下用裝載培養液裝載20min,再于0℃下用玻璃化液PVS
(3)在40℃水浴鍋中化凍2~3min,用洗滌液卸載30min,再用無菌紙吸干洗滌液后轉至恢復培養基中,于24℃下暗培養7d后轉移至光照強度為3000lx的光照下培養;
其中:
預處理液、裝載培養液、洗滌液、玻璃化液PVS
預處理液:MS,附加0.5mol/L蔗糖;用蒸餾水定容至1L;
裝載培養液:MS,附加2mol/L甘油和0.4mol/L蔗糖;用蒸餾水定容至1L;
洗滌液:MS,附加1.2mol/L蔗糖;用蒸餾水定容至1L;
玻璃化液PVS
恢復培養基:MS,附加6-BA 0.3mg/L,IAA1.0mg/L,用蒸餾水定容至1L,pH值為5.8。
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