[發明專利]基于一次成苗的桃樹雜種胚試管培育方法及培育基體有效
| 申請號： | 201610252780.8 | 申請日： | 2016-04-22 |
| 公開（公告）號： | CN105875399B | 公開（公告）日： | 2017-12-12 |
| 發明（設計）人： | 孫清榮;孫洪雁;李林光;何平;王海波 | 申請（專利權）人： | 山東省果樹研究所 |
| 主分類號： | A01H1/02 | 分類號： | A01H1/02;A01H4/00 |
| 代理公司： | 濟南譽豐專利代理事務所(普通合伙企業)37240 | 代理人： | 李茜 |
| 地址： | 271000 山*** | 國省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 基于 一次 桃樹 雜種 試管 培育 方法 基體 | ||
1.一種基于一次成苗的桃樹雜種胚試管培育方法，其特征是：其步驟是：a、無菌雜種胚的獲得：把果樹種子的種胚進行消毒處理得到無菌雜種胚樣本；
b、試管植株的獲得：在裝有培養基質的試管內，把無菌雜種胚進行培養，獲得胚萌發的植株得到試管植株；
c、試管外植株苗體的獲得：當試管植株的胚根上已生長形成若干側根并且大部分胚芽已生長形成10 cm以上的新梢；移栽到試管外育苗基質中，培育得到試管外植株，
其中：其步驟是：選取桃優系‘93’ב春雪’雜交種的成熟果實的胚為培育樣本，
a、無菌雜種胚的獲得：在超凈臺上用70%酒精擦洗果實表面，用滅菌刀切開果實取核，用滅菌錘子砸開核取出種胚，用無菌鑷子剝去種皮，把去種皮的胚用濃度為100m/L-500mg/L的赤霉素即GA3進行預處理得到無菌雜種胚樣本；
b、試管植株的獲得：去種皮胚經過100m/L-500mg/L的赤霉素預處理0.5-3小時后的無菌雜種胚樣本接種在裝有培養基質：MS + 1-5 mg/L GA3 + 25-35 g/L蔗糖的試管內，在培養室進行培養，獲得胚萌發的植株得到試管植株；
c、試管外植株苗體的獲得：當試管植株在試管內培養4-6周時，胚已萌發生長成為綠苗體，綠苗體表現為：胚根上已生長形成若干側根并且大部分胚芽已生長形成10 cm以上的新梢；
綠苗體進行試管外移栽，移栽前，先把瓶蓋打開，在溫度為20-25℃的散射陽光下練苗5-7天，用長鑷子把苗從試管中取出，放入水盆中，洗掉根部殘余培養基，移栽入裝有試管外育苗基質的營養缽中，苗移栽入營養缽后，澆透水，用透明性好的塑料溥膜進行覆蓋，對剛移栽的小苗進行保濕處理，以后每隔3-5天噴一次水，3-4周時，小苗長出新葉，此時可揭去塑料溥膜得到試管外植株，
試管內培養基質設置為包含有基本培養基、植物生長調節物質即赤霉素（GA3）、碳源即蔗糖、抗氧化劑即半胱氨酸和抗壞血酸、無離子水、瓊脂粉；
其中：基本培養基設置為 MS（Murashige and Skoog）培養基, MS 基本培養基組成為：
，
試管外育苗基質設置為包含有草炭、蛭石、珍珠巖，按照重量比例，草炭∶蛭石∶珍珠巖= 2∶0.8-1.1∶0.9-1.2。
2.根據權利要求1所述的基于一次成苗的桃樹雜種胚試管培育方法，其特征是：試管內培養基質在滅菌前調pH值到5.8，然后在121℃，1個大氣壓下高壓滅菌20分鐘。
3.根據權利要求1所述的基于一次成苗的桃樹雜種胚試管培育方法，其特征是：培養環境的培養溫度設置為25 ± 2℃并且培養環境的光照周期設置為16小時/天。
4.根據權利要求1所述的基于一次成苗的桃樹雜種胚試管培育方法，其特征是：雜種果樹品種設置為桃樹或油桃。
5.根據權利要求1所述的基于一次成苗的桃樹雜種胚試管培育方法，其特征是：其步驟是：
a、無菌雜種胚的獲得：取桃優系‘93’ב春雪’雜交種的成熟果實，剔除爛果，在超凈臺上用70%酒精擦洗果實表面，用滅菌刀切開果實取核，用滅菌錘子砸開核，取出種胚放在無菌培養皿內，用無菌鑷子剝去種皮，把去種皮的胚用濃度為100m/L-500mg/L的赤霉素(GA3)進行預處理0.5－3小時；
b、試管植株的獲得：經過赤霉素預處理的胚接種到裝有胚培養基：MS + 1-5 mg/L GA3+ 30 g/L蔗糖的試管中，每管接種1個胚，接種后的試管放在培養室培養，培養室培養溫度為25 ± 2℃，光照周期為16小時/天，光照強度為3000勒克斯；
c、試管外植株苗體的獲得：胚培養4－6周時，胚根產生較多側根，苗高也大都在10 cm以上，此時可以進行移栽，移栽前，先把瓶蓋打開，放在溫度為20-25℃的散射陽光下練苗5-7天，然后把苗移到溫室，用長鑷子把苗從瓶中取出，放入水盆中，洗掉根部殘余培養基,移栽入裝有育苗基質的營養缽中，育苗基質為草炭∶蛭石∶珍珠巖= 2∶0.8-1.1∶0.9-1.2，苗移栽入營養缽后，澆透水，用透明性好的塑料溥膜進行覆蓋，目的是對剛移栽的小苗進行保濕，以后每隔3-5天噴一次水，3-4周時，小苗長出新葉，表明植株已經成活，此時可揭去塑料溥膜。
6.一種基于一次成苗的桃樹雜種胚試管培育基體，設置為包含有試管內培養基質和試管外育苗基質，試管內培養基質設置為包含有基本培養基、植物生長調節物質、 碳源、抗氧化劑、無離子水、瓊脂粉；
其中：基本培養基設置為 MS（Murashige and Skoog）培養基, MS 基本培養基組成為：
試管外育苗基質設置為包含有草炭、蛭石、珍珠巖，按照重量比例，草炭∶蛭石∶珍珠巖= 2∶0.8-1.1∶0.9-1.2，
植物生長調節物質設置為赤霉素（GA3）， 碳源設置為蔗糖，抗氧化劑設置為半胱氨酸和抗壞血酸。
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