[發明專利]一種同時表達n個蛋白或蛋白亞基的方法及其專用系統

有效

• 申請號: 201610248592.8
• 申請日: 2016-04-20
• 公開（公告）號: CN107304432B
• 公開（公告）日: 2020-11-17
• 發明（設計）人: 翟宇佳;孫飛
• 申請（專利權）人: 中國科學院生物物理研究所
• 主分類號: C12N15/62
• 分類號: C12N15/62;C12N15/866;C07K19/00
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;何葉喧

1.一種同時表達Alpha亞基、Beta亞基、Beta’亞基、Gamma亞基、Delta亞基、Epsilon亞基和Zeta亞基的系統，包含DNA甲和DNA乙；

所述DNA甲的核苷酸序列的反向互補序列如序列表中序列3自5'末端起第3992至第12927位所示；

所述DNA乙的核苷酸序列如序列表中序列3自5'末端起第12951至第22314位所示；

所述DNA甲和所述DNA乙存在于同一質粒；所述質粒是以重組質粒pFBD-mCEG為出發質粒，插入所述DNA甲和所述DNA乙得到的；所述重組質粒pFBD-mCEG為將質粒pFastbac-Dual的限制性內切酶KpnⅠ和HindⅢ的識別序列間的DNA小片段替換為核苷酸序列是序列表的序列1所示的DNA分子，得到的重組質粒；

所述Alpha亞基、所述Beta亞基、所述Beta’亞基、所述Gamma亞基、所述Delta亞基、所述Epsilon亞基和所述Zeta亞基組成人源COPI復合體。

2.一種轉移載體，其核苷酸序列如序列表中序列3所示。

3.權利要求1所述的系統在同時表達Alpha亞基、Beta亞基、Beta’亞基、Gamma亞基、Delta亞基、Epsilon亞基和Zeta亞基中的應用。

4.權利要求2所述轉移載體在同時表達Alpha亞基、Beta亞基、Beta’亞基、Gamma亞基、Delta亞基、Epsilon亞基和Zeta亞基中的應用。

5.一種同時表達Alpha亞基、Beta亞基、Beta’亞基、Gamma亞基、Delta亞基、Epsilon亞基和Zeta亞基的方法，包括如下步驟：將權利要求2所述轉移載體轉化受體菌并培養，獲得重組桿狀病毒穿梭載體；將所述重組桿狀病毒穿梭載體轉染昆蟲細胞，繼而表達所述Alpha亞基、所述Beta亞基、所述Beta’亞基、所述Gamma亞基、所述Delta亞基、所述Epsilon亞基和所述Zeta亞基。