[發明專利]一種高活性蛋清抗氧化肽的制備工藝

在審

• 申請號: 201610248535.X
• 申請日: 2016-04-20
• 公開（公告）號: CN105779544A
• 公開（公告）日: 2016-07-20
• 發明（設計）人: 徐杰馳;陳曉林
• 申請（專利權）人: 潛山縣天勝農業生態科技發展有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及蛋清蛋白技術領域，具體涉及一種高活性蛋清抗氧化 肽的制備工藝。

背景技術

我國擁有世界上最為豐富的禽蛋資源，禽蛋產量1985年以來一 直居世界第一位。蛋清粉是一種資源豐富、價格低廉的優質蛋白資 源，主要包含卵清蛋白、卵轉鐵蛋白、溶菌酶、卵粘蛋白、類卵粘蛋 白、卵球蛋白和抗生物素蛋白，這些蛋白質含有人體所必需的多種氨 基酸，且氨基酸組成配比均衡性好，機體利用率高。但是，蛋清粉腥 味重、溶解性差、粘度大、受熱易凝固，這些性質限制了它在食品加 工中的應用。因此，非常有必要對蛋清粉進行深加工，以提高蛋清粉 的應用價值。

隨著禽蛋產量大幅度增長，蛋品加工深度與技術含量不斷提高。 到目前為止，主要有三種蛋清深加工方法，即傳統理化加工法、微生 物發酵法以及蛋白酶體外酶解法。蛋清經蛋白酶適宜酶解后，除可在 一定程度上改善其功能特性和降低過敏原性蛋白的抗原性外，還可產 生一些具有特殊生物學活性的小肽。國內外學者關于蛋清蛋白酶解產 物抗腫瘤、抗高血壓、免疫調節等研究取得顯著成果。而對蛋清酶解 產物抗氧化性的研究相對較少，更缺乏系統性。

發明內容

本發明旨在提供了一種高活性蛋清抗氧化肽的制備工藝。

本發明提供如下技術方案：

一種高活性蛋清抗氧化肽的制備工藝，包括以下步驟：

(1)取鮮蛋清粉加水溶解，再加入到磷酸鹽緩沖液中配制成蛋 清蛋白懸濁液，在72-85℃保持15min，并不斷攪拌使蛋清蛋白變性， 冷卻至室溫，按10000U/g蛋白的比例向上述蛋清液中加入堿性蛋白 酶進行水解；

(2)步驟(1)經堿性蛋白酶解結束后，加入胃蛋白酶水解，反 應后于沸水浴中滅酶，冷卻至室溫后調pH值至5.0-6.0，離心并收 集上清液，得到蛋清酶解液；

(3)將步驟(2)所得蛋清酶解液進行超濾，收集分子量＜2.5k Da的組分，真空濃縮后冷凍干燥得蛋清蛋白抗氧化肽粗品；

(4)取步驟(3)所得蛋清蛋白抗氧化肽粗品經SephadexG-25 凝膠柱層析，洗脫液為NaCl溶液，收集、真空濃縮并冷凍干燥洗脫 組分，即可獲得高活性蛋清蛋白抗氧化肽。

所述步驟(1)中磷酸鹽緩沖液為0.05mol/L、pH8.5。

所述步驟(2)中沸水浴滅酶的時間為8-15min。

所述步驟(2)中離心條件為3000-4500r/min，離心15-20min。

所述步驟(3)中真空濃縮濃縮至濃度為15-22mg/mL，所述步 驟(4)中的濃縮至濃度為8-12mg/mL。

所述步驟(4)中冷凍條件為-12-0℃。

與現有技術相比，本發明的有益效果是：本發明采用酶解、超 濾、凝膠層析等生物技術手段，方法過程簡單，反應條件溫和，成 本低，產物活性高易溶于水，對環境沒有任何污染；同時降低了蛋 白的抗原性，改善其功能特性，還可抑制和清除自由基，為提高蛋 清蛋白附加值、雞蛋深加工及應用開辟新途徑，市場前景廣闊。

具體實施方式

下面將結合本發明實施例，對本發明實施例中的技術方案進行清 楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本發明一部分實施例， 而不是全部的實施例。基于本發明中的實施例，本領域普通技術人員 在沒有做出創造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本發 明保護的范圍。

一種高活性蛋清抗氧化肽的制備工藝，包括以下步驟：

(1)取鮮蛋清粉加水溶解，再加入到磷酸鹽緩沖液中配制成蛋 清蛋白懸濁液，在72-85℃保持15min，并不斷攪拌使蛋清蛋白變性， 冷卻至室溫，按10000U/g蛋白的比例向上述蛋清液中加入堿性蛋白 酶進行水解；

(2)步驟(1)經堿性蛋白酶解結束后，加入胃蛋白酶水解，反 應后于沸水浴中滅酶，冷卻至室溫后調pH值至5.0-6.0，離心并收 集上清液，得到蛋清酶解液；

(3)將步驟(2)所得蛋清酶解液進行超濾，收集分子量＜2.5k Da的組分，真空濃縮后冷凍干燥得蛋清蛋白抗氧化肽粗品；

(4)取步驟(3)所得蛋清蛋白抗氧化肽粗品經SephadexG-25 凝膠柱層析，洗脫液為NaCl溶液，收集、真空濃縮并冷凍干燥洗脫 組分，即可獲得高活性蛋清蛋白抗氧化肽。