[發(fā)明專利]一種非標記型核酸適配體傳感器及對雙酚A的檢測方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610246334.6
• 申請日: 2016-04-20
• 公開（公告）號: CN105784810B
• 公開（公告）日: 2018-04-03
• 發(fā)明（設計）人: 楊紹明;鄭玥;李玲玲;張小榮;丁紹卿;陳愛喜
• 申請（專利權）人: 華東交通大學
• 主分類號: G01N27/327
• 分類號: G01N27/327
• 代理公司: 南昌市平凡知識產(chǎn)權代理事務所36122
• 代理人: 姚伯川

1.一種非標記型核酸適配體傳感器的制備方法，其特征在于，所述方法步驟為：

(1)將干凈的玻碳電極置于含有0.04～0.12mol/L的HAuCl₄和0.002～0.006mol/L的Pb(CH₃COO)₂溶液中，于-0.2～-0.7V恒電位電沉積20～120s，制得多孔納米金修飾的玻碳電極；

(2)將(1)得到的多孔納米金修飾電極依次置于含有0.3～1.5μmol/L的雙酚A核酸適配體中6～24h，0.5～1.5mmol/L的6-巰基己醇中20～80min，0.3～1.5μmol/L的互補DNA中20～80min，制得雙鏈DNA/多孔納米金修飾的玻碳電極；

(3)將(2)得到的雙鏈DNA/多孔納米金修飾的玻碳電極置于0.1～0.4mmol/L的亞甲基藍溶液中浸泡5～25min，利用亞甲基藍與雙鏈DNA之間的靜電作用，將其嵌入雙鏈DNA中，得到亞甲基藍/雙鏈DNA/多孔納米金修飾的玻碳電極，該修飾電極即為測定雙酚A的核酸適配體傳感器。

2.根據(jù)權利要求1所述的制備方法制備的非標記型核酸適配體傳感器對雙酚A的檢測方法，其特征在于，所述方法如下：

利用大比表面積的多孔納米金的信號放大作用和適配體對雙酚A的特異性結合作用，導致嵌在雙鏈DNA中的亞甲基藍的濃度降低從而使亞甲基藍的信號降低，采用電化學差分脈沖伏安法用于對雙酚A檢測，將核酸適配體修飾電極為工作電極，參比電極為Ag/AgCl電極，輔助電極為鉑電極，組成三電極體系，即可實現(xiàn)對雙酚A的檢測。

3.根據(jù)權利要求2所述一種非標記型核酸適配體傳感器對雙酚A的檢測方法，其特征在于，所述核酸適配體傳感器用于檢測雙酚A的線性范圍為100.0fg/mL～100.0ng/mL，檢測限為32.9fg/mL。