[發明專利]一種高效液相色譜法分離與測定阿普斯特及有關物質的方法

有效

• 申請號: 201610242289.7
• 申請日: 2016-04-19
• 公開（公告）號: CN107305198B
• 公開（公告）日: 2021-04-13
• 發明（設計）人: 張吉;周春燕;譚輝;顏波;周維
• 申請（專利權）人: 重慶華邦勝凱制藥有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 北京元本知識產權代理事務所(普通合伙) 11308
• 代理人: 黎昌莉

本發明屬于分析化學技術領域，涉及阿普斯特與有關物質的分離及檢測，具體來說，涉及采用高效液相色譜法分離與測定阿普斯特及有關物質的方法。該方法以十八烷基硅烷鍵合硅膠為固定相，以乙腈和/或甲醇的水溶液為流動相，所述流動相中還含有體積百分濃度為0.02?0.15％的磷酸。該方法對目前已知的在阿普斯特合成過程中可能會產生的五種有關物質均能適用，可以同時對其中的一種或多種有關物質進行分離檢測，基線平穩，能更準確、更有效地檢測分離上述的五種有關物質，從而能更精準的確保阿普斯特原料及其制劑的質量可控，并最終確定產品的安全有效。

技術領域

本發明屬于分析化學技術領域，涉及阿普斯特與有關物質的分離及檢測，具體來說，涉及采用高效液相色譜法分離與測定阿普斯特及有關物質的方法。

背景技術

阿普斯特是一種磷酸二酯酶抑制劑，為首個被FDA在2014年3月21日批準上市、用于治療銀屑病引起的關節炎(PsA)的小分子藥物，原研公司為Celgene。阿普斯特分子式為C₂₂H₂₄N₂O₇S，化學名為N-[2-[(1S)-1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基1)-2-(甲磺酰基)乙基]-2,3-二氫-1,3-二酮-1H-異吲哚-4-基]乙酰胺，其化學結構式如下：

在阿普斯特合成過程中，會產生一些相關的雜質物質如生產過程中產生的副產物或中間體或降解產物等，這些雜質可能會由于去除不完全而影響藥物的純度和質量，目前，已知的雜質物質有5種，分別為：如式Ⅰ所示的有關物質1(工藝雜質/降解產物)、如式Ⅱ所示的有關物質2(工藝雜質/降解產物)、如式Ⅲ所示的有關物質3(工藝雜質)、如式Ⅳ所示的有關物質4(工藝雜質)和如式Ⅴ所示的有關物質5(工藝雜質/降解產物)，這5種有關物質的結構式如下：

對于阿普斯特合成工藝中引入的上述副產物和中間體，在阿普斯特原料藥中需要進行質量控制，而阿普斯特相關的降解雜質需要在阿普斯特原料藥及制劑中進行質量控制，因此，實現阿普斯特及有關物質的分離和測定對阿普斯特原料及制劑的生產和貯存具有重要的意義。

現有技術中，申請號為201410765717.5的發明專利公開了一種用液相色譜法分離測定阿普斯特有關物質的方法，該方法以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料的色譜柱，以0.1％三氟乙酸與乙腈為流動相，定量測定阿普斯特及其有關物質的含量；但是，采用申請號為201410765717.5的發明專利中公開的方法不能完全將阿普斯特及有關雜質分離，且系統基線漂移嚴重，該方法并不能適用于其他的有關雜質，也不能同時完全分離檢測本申請中所述的五種雜質，說明目前現有技術中公開的方法不能同時適用于上述的五種雜質的檢測。

發明內容

有鑒于此，本申請發明人通過大量實驗摸索了阿普斯特有關物質的質量控制方法，并嚴格進行方法驗證，保證方法的科學嚴謹，滿足了研發和生產的需求。因此，本發明的目的首先在于提供一種分離阿普斯特及有關物質的方法。其次，本發明的目的還在于提供一種高效液相色譜法分離與測定阿普斯特及有關物質的方法。

為實現上述目的，本發明的技術方案為：

分離阿普斯特及有關物質的方法，所述方法以十八烷基硅烷鍵合硅膠為固定相，以乙腈和/或甲醇的水溶液為流動相。

進一步，所述的方法，所述流動相中還含有體積百分濃度為0.02-0.15％的磷酸，優選體積百分濃度為0.02-0.1％，更優選體積百分濃度為0.05％。

進一步，所述的方法，所述有關物質為式Ⅰ、式Ⅱ、式Ⅲ、式Ⅳ、式Ⅴ中的一種或多種；式Ⅰ、式Ⅱ、式Ⅲ、式Ⅳ、式Ⅴ的結構式如下所示：