[發(fā)明專利]多西環(huán)素一水物的有關(guān)物質(zhì)及其分析檢測方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610240654.0
• 申請日: 2016-04-18
• 公開（公告）號: CN105924367B
• 公開（公告）日: 2017-12-29
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 潘立;李義高;李小彪;趙陽
• 申請（專利權(quán)）人: 鎮(zhèn)江高海生物藥業(yè)有限公司
• 主分類號: C07C237/26
• 分類號: C07C237/26;C07C231/12;C07C231/24;G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 南京匯盛專利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙)32238
• 代理人: 陳揚

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物制藥領(lǐng)域，具體涉及一種多西環(huán)素一水物光降解產(chǎn)物，以及該光降解產(chǎn)物的制備方法和分析檢測方法。

背景技術(shù)

多西環(huán)素一水物又稱強力霉素一水物，是一種抗感染藥物，其抗菌譜和四環(huán)素、土霉素基本相同，但抗菌作用比四環(huán)素、土霉素強5～10倍，特別對四環(huán)素耐藥的金黃色葡萄球菌有效。鹽酸強力霉素口服吸收良好，排泄緩慢，血藥濃度維持有效水平較四環(huán)素、土霉素久(半衰期15-20h)，每日口服一次即可，用于上呼吸道感染、滲出性及急性扁桃體炎、老年慢性支氣管炎、肺部感染及尿路感染、菌痢、急性淋巴結(jié)炎等。

目前，對多西環(huán)素一水物的有關(guān)物質(zhì)研究還不夠，有待進一步研究。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的第一目的在于提供一種多西環(huán)素一水物的光降解產(chǎn)物，該光降解產(chǎn)物首次報道；

本發(fā)明的第二目的在于提供所述光降解產(chǎn)物的制備方法；

本發(fā)明的第三目的在于提供所述光降解產(chǎn)物的分析檢測方法；

本發(fā)明的第四目的在于提供所述光降解產(chǎn)物在多西環(huán)素一水物及其制劑的有關(guān)物質(zhì)檢查項中作為雜質(zhì)對照品的用途。

上述目的是通過如下技術(shù)方案實現(xiàn)的：

一種多西環(huán)素一水物光降解產(chǎn)物，化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下：

一種所述光降解產(chǎn)物的制備方法，包括如下步驟：

(1)光照破壞樣品制備：將多西環(huán)素一水物光照破壞，先經(jīng)冷白熒光燈照射，再經(jīng)紫外熒光燈照射；

(2)降解產(chǎn)物富集：將上述光照破壞樣品溶于甲醇體積百分濃度為80％的甲醇水溶液中，攪拌，抽濾，收集濾液，減壓濃縮得濃縮物；

(3)降解產(chǎn)物粗品：將上述濃縮物用正相硅膠柱色譜分離，用體積比為6:1的二氯甲烷-甲醇混合溶劑等度洗脫，收集8～10個柱體積洗脫液，濃縮得降解產(chǎn)物粗品；

(4)反相硅膠柱制備：將上述降解產(chǎn)物粗品用反相硅膠柱純化，固定相為十八烷基硅烷鍵合硅膠，流動相為甲醇體積百分濃度為85％的甲醇水，等度洗脫，收集9～11個柱體積洗脫液，濃縮，冷凍干燥即得所述光降解產(chǎn)物。

進一步地，步驟(1)所述光照破壞方法為：先經(jīng)一百二十萬勒克斯冷白熒光燈照射15～25小時，再經(jīng)200瓦小時/平方米的紫外熒光燈照射10～20小時。先經(jīng)冷白熒光照射，再經(jīng)紫外熒光照射，能顯著提高所述光降解產(chǎn)物的得率，光照時間過長不但不能繼續(xù)提高得率，反而會有降低趨勢，可能是因為會進一步轉(zhuǎn)化成其他化學(xué)物質(zhì)。

進一步地，步驟(3)所述正相硅膠粒徑大小為200～300目。分離硅膠粒徑大小決定了硅膠表面積，粒徑太大會導(dǎo)致所述光降解產(chǎn)物與極性相近的雜質(zhì)難以分離開，粒徑太小會顯著增大柱內(nèi)壓力，洗脫速度過慢。同時，硅膠粒徑還影響所需要的洗脫液體積。

一種所述光降解產(chǎn)物的液相分析檢測方法，HPLC色譜條件包括：

色譜柱：Agilent Zorbax Extent-C18柱(4.6mm×250mm，5μm)；

流動相：A為乙腈，B為0.5％磷酸溶液；

梯度洗脫程序：0.01～5min，A 10％→15％；5～10min，A 15％→48％；10～25min，A48％→78％；25～30min，A 78％→10％；

流動相流速：1.0mL·min^-1；

檢測波長：284nm；

柱溫：35℃；

進樣量：10μL。

上述色譜條件下，所述光降解產(chǎn)物能與極性相近的化合物完全分離開，分離度大于1.5。流動相在284nm檢測波長下紫外本底吸收低，且284nm為所述光降解產(chǎn)物的最大吸收波長，保證了所述光降解產(chǎn)物的響應(yīng)靈敏度，提高檢出量。

所述的多西環(huán)素一水物光降解產(chǎn)物在多西環(huán)素一水物及其制劑的有關(guān)物質(zhì)檢查項中作為雜質(zhì)對照品的用途。該光降解產(chǎn)物容易獲得，且純度高(大于98％)，可以使用該化合物作為對照品利用外標(biāo)法對其進行質(zhì)量控制。

本發(fā)明的有益效果：

(1)本發(fā)明發(fā)現(xiàn)了一種多西環(huán)素一水物光降解產(chǎn)物，該降解產(chǎn)物結(jié)構(gòu)首次報道；

(2)本發(fā)明提供的所述光降解產(chǎn)物的制備方法簡單易行，可大量制備該降解產(chǎn)物；

(3)本發(fā)明提供的液相分析方法能快速檢測出所述降解產(chǎn)物，選擇該降解產(chǎn)物的最大吸收波長作為檢測波長，提高了該降解產(chǎn)物的檢出率，結(jié)果準(zhǔn)確可靠；

(4)本發(fā)明提供的光降解產(chǎn)物可以用于多西環(huán)素一水物及其制劑的有關(guān)物質(zhì)檢查，進一步提高多西環(huán)素一水物及其制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，提高其安全性和可控性。