[發(fā)明專利]一種H9亞型禽流感DNA疫苗及其制備方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201610237685.0 | 申請日: | 2016-04-14 |
| 公開(公告)號: | CN105770883A | 公開(公告)日: | 2016-07-20 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 焦培榮;廖明;宋慧 | 申請(專利權(quán))人: | 華南農(nóng)業(yè)大學(xué) |
| 主分類號: | A61K39/145 | 分類號: | A61K39/145;A61K48/00;A61P31/16;C12N15/85;C12N15/66 |
| 代理公司: | 北京華仲龍騰專利代理事務(wù)所(普通合伙) 11548 | 代理人: | 李靜 |
| 地址: | 510642 廣*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 h9 禽流感 dna 疫苗 及其 制備 方法 | ||
1.一種H9亞型禽流感DNA疫苗,其特征在于:該疫苗是由HA基因和真核表達載體組成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種H9亞型禽流感DNA疫苗,其特征在于:所述HA基因為:野生 型毒株A/Chicken/Guangdong/G14-10/2012的HA基因HA9seq或者密碼子優(yōu)化型optiHA基因 optiHA9seq。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種H9亞型禽流感DNA疫苗,其特征在于:真核表達載體均是 由內(nèi)切酶SacI和XhoI同時切割質(zhì)粒pCAGG得來的載體片段。
4.一種如權(quán)利要求1所述的H9亞型禽流感DNA疫苗的制備方法,其特征在于,包括以下 步驟:
S1:獲取野生型H9亞型禽流感病毒的HA基因HA9seq;
S2:獲取H9亞型禽流感毒株根據(jù)雞密碼子偏嗜性優(yōu)化的optiHA基因optiHA9seq;
S3:利用內(nèi)切酶處理目的基因HA9seq和optiHA9seq與真核表達載體;S4:回收目的片段 與載體片段,連接轉(zhuǎn)化篩選陽性菌落后,提取質(zhì)粒并進行酶切鑒定。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述一種H9亞型禽流感DNA疫苗的制備方法,其特征在于:所述步驟 S1中擴增野生型H9亞型禽流感病毒的HA基因HA9seq時的引物,是在5’端添加SacI酶切位 點,在3’端添加XhoI酶切位點:
5’-TCAGTACTATGGAGACAGTATCACTAAT;
3’-GACTCGAGTTATATACAAATGTTGCATC。
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