[發(fā)明專利]一種生產(chǎn)含高硒蛋白紅球藻的方法、檢測(cè)方法及其應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610234898.8
• 申請(qǐng)日: 2016-04-15
• 公開（公告）號(hào): CN105695388A
• 公開（公告）日: 2016-06-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 胡章立;鄭怡鴻;李澤;陶明;賈彬
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 深圳大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N1/38
• 分類號(hào): C12N1/38;C12N1/12;G01N27/62;A61K36/04;A61P1/14;A23L33/10;C12R1/89
• 代理公司: 深圳市千納專利代理有限公司 44218
• 代理人: 胡堅(jiān)

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于水生生物學(xué)與生物技術(shù)領(lǐng)域，具體來講涉及一種利用無機(jī)硒促 進(jìn)雨生紅球藻富集硒蛋白的方法。

背景技術(shù)

硒是一種人體必需的微量營(yíng)養(yǎng)元素，常以氧化態(tài)Se(Ⅱ)、Se(Ⅳ)、Se(Ⅵ)形 式存在，并為許多重要的細(xì)胞與生命活動(dòng)提供支持。缺硒會(huì)導(dǎo)致一些重要的生 理過程失調(diào)，從而導(dǎo)致心臟病、神經(jīng)肌肉失調(diào)、癌癥與炎癥以及不育，硒同時(shí) 也被認(rèn)為與動(dòng)物發(fā)育、免疫功能、抑制病毒等有密切關(guān)系，對(duì)人體健康有益的 硒每日建議攝入量為50-200微克。中國(guó)大陸部分地區(qū)土壤含硒量低，使得居民 無法補(bǔ)充足夠的硒而影響健康，我國(guó)13個(gè)省市的營(yíng)養(yǎng)調(diào)查表明，成人每日硒攝 入量?jī)H不到27微克，相對(duì)于過量的無機(jī)硒對(duì)生物體具有一定毒性，在我國(guó)補(bǔ)硒 提倡采用安全性更高的有機(jī)硒強(qiáng)化劑。

有機(jī)硒主要包括硒蛋白、富硒酵母和硒化卡拉膠等，硒元素化學(xué)性質(zhì)類似 硫元素，因此許多含硫氨基酸能被硒替代而形成含硒氨基酸，如甲硫氨酸、半 胱氨酸和胱氨酸。其中，硒代半胱氨酸(Sec)是一種具有重要生物活性的氨基 酸，被稱為“第21種氨基酸”，而硒蛋白是一種含有至少一個(gè)硒代半胱氨酸的 蛋白質(zhì)，在細(xì)胞內(nèi)主要擔(dān)任抗氧化酶的作用，因此，硒蛋白具有安全性高，易 吸收且利用率高，是補(bǔ)充硒元素的最佳途徑。

目前市場(chǎng)上主要的富硒產(chǎn)品中，富硒蔬菜對(duì)硒的吸收富集能力有限，且受 土壤等環(huán)境因素影響，富硒酵母與植物相似，所富集的有機(jī)硒主要以硒代甲硫 氨酸為主。傅瑞娟(2010)報(bào)道的實(shí)驗(yàn)表明：對(duì)組織中多種抗氧化酶的影響， 硒代半胱氨酸的作用效果優(yōu)于富硒酵母。因此，相對(duì)于普通的有機(jī)硒，含硒代 半胱氨酸的硒蛋白作為硒強(qiáng)化劑對(duì)于提高機(jī)體抗氧化能力有更好的效果。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種有機(jī)硒的制備方法，將亞硒酸鈉添加到雨生紅 球藻的培養(yǎng)體系中，使整個(gè)培養(yǎng)體系中亞硒酸鈉的濃度控制在0.01-23.0mg/L的 范圍內(nèi)。為實(shí)現(xiàn)這個(gè)目的，本發(fā)明采用的方法如下：

一種生產(chǎn)含高硒蛋白紅球藻的方法，所述的方法包括如下步驟：

1.1將雨生紅球藻在培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為22±0.5℃，光強(qiáng)20 μmolm^-2s^-1；雨生紅球藻的生長(zhǎng)分為接種階段、營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)階段、細(xì)胞 類型轉(zhuǎn)化階段和藻細(xì)胞蝦青素累積階段；

所述的培養(yǎng)基的組成如下：NaNO₃：0.2g/L，K₂HPO₄：0.02g/L，MgSO₄·7H₂O：0.02g/L，土壤提取液：30mL/L，EDTA：0.004g/L,FeSO₄·7H₂O：0.0035g/L，ZnSO₄·7H₂O：5×10^-6g/L，MnSO₄·4H₂O：1×10^-5g/L，H₃BO₃：5×10^-5g/L，CuSO₄·5H₂O：2.5×10^-8g/L，Co(NO₃)₂·6H₂O：5×10^-6g/L，蛋白胨1g/L，pH為7-8.5。可添加亞硒酸鈉使整個(gè)體系中亞硒酸鈉的濃度控制在0.01-3mg/L，亦可不添加亞硒酸鈉,制備培養(yǎng)基時(shí)添加適量的亞硒酸鈉可以用于促進(jìn)藻細(xì)胞的生長(zhǎng)；