[發明專利]一種生產含高硒蛋白紅球藻的方法、檢測方法及其應用

在審

• 申請號: 201610234898.8
• 申請日: 2016-04-15
• 公開（公告）號: CN105695388A
• 公開（公告）日: 2016-06-22
• 發明（設計）人: 胡章立;鄭怡鴻;李澤;陶明;賈彬
• 申請（專利權）人: 深圳大學
• 主分類號: C12N1/38
• 分類號: C12N1/38;C12N1/12;G01N27/62;A61K36/04;A61P1/14;A23L33/10;C12R1/89
• 代理公司: 深圳市千納專利代理有限公司 44218
• 代理人: 胡堅

1.一種生產含高硒蛋白紅球藻的方法，其特征在于，所述的方法包括如下步驟：

1.1將雨生紅球藻在培養基中培養，培養溫度為22±0.5℃，光強20 μmolm^-2s^-1；所述的培養基組成如下：NaNO₃：0.2g/L，K₂HPO₄： 0.02g/L，MgSO₄·7H₂O：0.02g/L，土壤提取液：30mL/L，EDTA： 0.004g/L,FeSO₄·7H₂O：0.0035g/L，ZnSO₄·7H₂O：5×10^-6g/L， MnSO₄·4H₂O：1×10^-5g/L，H₃BO₃：5×10^-5g/L，CuSO₄·5H₂O： 2.5×10^-8g/L，Co(NO₃)₂·6H₂O：5×10^-6g/L，蛋白胨1g/L，亞硒 酸鈉：0-3mg/L，pH為7-8.5；

1.2誘導紅球藻產生高硒蛋白，其方法是向培養體系添加亞硒酸鈉，使培 養體系中亞硒酸鈉的終濃度為3mg/L-33mg/L；

1.3培養5-15天，每天上午下午各搖一次；

1.4收集培養后的含高硒蛋白紅球藻。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟1.2中亞硒酸鈉的終濃度為13 mg/L。

3.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟1.2中于培養的第一天向培養 基中加入亞硒酸鈉。

4.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟1.2中于培養期間向培養基內 添加一次以上的亞硒酸鈉。

5.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟1.3中培養的時間為14天。

6.一種在紅球藻中檢測有機硒的方法，其特征在于，所述的檢測方法包括如下 步驟：

6.1離心收集培養后的雨生紅球藻，60℃烘箱干燥24h，稱取樣品，分別 加入ddH₂O中，加熱至近沸，保持8-12min，冷卻后，轉入容量瓶 中定容，搖勻，干過濾，取濾液，加入環己烷萃取后，水相轉入離心 管，測定水相中無機硒含量；

6.2再稱取和上一步驟中同樣重量的樣品，放入消解罐內，再加入95％ 濃硝酸和20％過氧化氫溶液消解，將消解后的樣品倒入燒杯內，保持 近沸除去多余的硝酸，ddH₂O定容后，測定總硒含量，其中95％濃硝 酸和20％過氧化氫溶液，按3:1的比例混合；

6.3計算：有機硒的含量＝總硒含量－無機硒含量。

7.如權利要求1-5任一權利要求所述的含高硒蛋白紅球藻在制備食品中的應用。

8.如權利要求1-5任一權利要求所述的含高硒蛋白紅球藻在制備保健品中的應 用。

9.如權利要求1-5任一權利要求所述的含高硒蛋白紅球藻在制備藥品中的應用。