[發明專利]一種液質聯用檢測技術中減弱基質效應的方法

有效

• 申請號: 201610227777.0
• 申請日: 2016-04-13
• 公開（公告）號: CN105675772B
• 公開（公告）日: 2018-03-23
• 發明（設計）人: 楊國生;李紅娥;陳子雷;李慧冬
• 申請（專利權）人: 山東大學
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/16
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司37221
• 代理人: 趙妍

技術領域

本發明涉及液相色譜-串聯質譜聯用檢測技術領域，具體涉及液相色譜-串聯質譜聯用檢測技術中減弱基質效應的方法。

背景技術

液相色譜-串聯質譜(LC-MS/MS)聯用檢測技術中，與目標物共流出的干擾物在離子源離子化時影響了分析物，從而產生了基質效應。主要包括：1.由于離子化時，帶電液滴的表面大小和額外電量的數量(10^-5mol/L)都是有限的，所以干擾物會與目標物競爭這有限的表面和電量導致目標物離子化不完全；(2)干擾物的存在會改變分析物粘度、表面張力等物化性質而影響目標物的離子化；(3)基質中一些非揮發性物質會與目標化合物形成絡合物或沉積物導致無法成功生成氣態離子。基質效應按照影響效果可分為三類：ME<0，意味基質的存在抑制了分析物的響應值；ME＝0，表明基質的存在對該分析物的響應值無影響；ME>0，意味著基質的存在增強了分析物的響應。

基質效應按絕對值大小可以分為三個等級：

∣ME∣≥50％，稱為強基質效應；

20％≤∣ME∣<50％，稱為中等強度基質效應；

0％≤∣ME∣<20％，稱為弱基質效應。

近幾年，基質效應的消除和彌補方法得到廣泛的研究，其中應用最多的是基質加標和基質稀釋法。但是，基質稀釋過程需要使用大量的有機溶劑并且耗時，標準曲線的配制不僅需要大量的空白樣品，而且由于基體物質的復雜性使得標準樣品的保存時間較短。液質聯用檢測系統中，由于增加了離子化的過程，當進樣體積較大的時候，引入了更多的基質干擾物導致離子化不完全而影響方法的靈敏度，這就直接導致化合物的進樣體積與響應值的線性范圍變窄。

發明內容

為克服現有技術的缺陷，本發明提出一種液質聯用檢測技術中減弱基質效應的方法，在減弱基質效應的同時，無需使用大量有機溶劑、不耗時。

為實現上述目的，本發明的技術方案為：

一種液質聯用檢測技術中減弱基質效應的方法，以液相色譜-串聯質譜聯用檢測方法檢測果蔬中農藥殘留時，采用小體積進樣：當樣品為弱基質效應樣品時，進樣體積小于5μL；當樣品為中等強度基質效應樣品時，進樣體積小于等于2μL；當樣品為強基質效應樣品時，先通過一定程度的基質稀釋，再采用小體積進樣。

在傳統液相色譜-串聯質譜聯用的檢測中，一般選用5μL或10μL進行進樣，所以進樣體積小于5μL的進樣即為本發明所指的小體積進樣。

本發明通過小體積進樣，無需使用大量溶劑進行稀釋，降低了檢測成本，降低了檢測時間，提高了檢測效率，不僅可以減弱基質效應，還能優化峰形從而提高儀器的方法靈敏度。

優選的，當強基質效應樣品為甘藍時，將甘藍樣品稀釋10倍后，進樣體積小于2.5μL。

優選的，質譜的掃描模式為多反應監測掃描模式；離子模式為電噴霧正離子源ESI⁺。

優選的，質譜的參數如下：池加速電壓為4V，駐留時間，20ms；干燥氣溫度，325℃；干燥氣流速，8L/min；霧化器壓力，35psi；鞘氣溫度，375℃；鞘氣流速，11L/min；毛細管電壓，4000V；光電倍增管電壓，300V。

優選的，液相色譜柱為50mm×2.1mm，1.8μm粒徑，流速為0.3mL/min，運行時間為8min，柱溫為35℃。

優選的，液相色譜流動相A為純水，流動相B為甲醇。

進一步優選的，所述梯度洗脫程序為，起始時間，流動相A：B的體積比為90:10，維持0.2min；在0.2-5min內，體積比由90:10線性變化至10:90，并維持該體積至6min，6.1min時，體積比迅速變回起始體積比—90:10。

進一步優選的，樣品的提取和凈化的方法為，將樣品放至離心管中加入提取劑，再在勻漿機上勻質后加入NaCl和無水MgSO₄，然后震蕩離心，取上層清液干燥后加入流動相A和B的混合液溶解，最后將溶液過尼龍膜后進樣。無水MgSO₄去除過量的水，NaCl使有機相和水相充分分離，并調節有機相離子濃度從而提高提取效率。