[發(fā)明專利]一種雙拷貝人p53基因重組腺病毒及其制備方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201610224992.5 | 申請日: | 2016-04-12 |
| 公開(公告)號: | CN105755043B | 公開(公告)日: | 2019-03-15 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 高貴;光煒 | 申請(專利權(quán))人: | 高貴;光煒 |
| 主分類號: | C12N15/861 | 分類號: | C12N15/861;C12N7/01;A61K38/17;A61K48/00;A61P35/00 |
| 代理公司: | 大連東方專利代理有限責任公司 21212 | 代理人: | 劉慧娟;李馨 |
| 地址: | 天津市河東區(qū)衛(wèi)國道雪蓮*** | 國省代碼: | 天津;12 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 拷貝 p53 基因 重組 病毒 及其 制備 方法 | ||
1.一種雙拷貝人p53基因重組腺病毒,其特征在于:其制備方法為,將雙拷貝人p53基因表達盒序列克隆到腺病毒穿梭質(zhì)粒pShuttle,分別用HindIII和KpnI酶切純化的pShuttle質(zhì)粒與序列為SEQ ID NO.1所示的DNA片段,將陽性克隆用Pme I酶切,將酶切產(chǎn)物與腺病毒基本骨架重組載體pAdEasy,經(jīng)電穿孔法共轉(zhuǎn)染大腸桿菌BJ5183,進行同源重組,篩選陽性克隆后提取質(zhì)粒,用Pac I酶切所述的雙拷貝人p53基因重組5型腺病毒載體質(zhì)粒,使其線性化,再用CsCl2純化,經(jīng)LipofecAMINE2000法轉(zhuǎn)染HEK293細胞,5%CO2,37℃孵育培養(yǎng)10~14天后,刮取細胞,離心去除上層培養(yǎng)液,留2mL培養(yǎng)液,震蕩混合,用干冰加乙醇浴法冷凍,37℃水浴溶解,重復進行冷凍、溶解、震蕩裂解細胞,獲得病毒顆粒。
2.如權(quán)利要求1所述的雙拷貝人p53基因重組腺病毒在制備腫瘤抑制藥物中的應(yīng)用。
該專利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息,商用須獲得專利權(quán)人授權(quán)。該專利全部權(quán)利屬于高貴;光煒,未經(jīng)高貴;光煒許可,擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購買此專利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作,請聯(lián)系【客服】
本文鏈接:http://www.szxzyx.cn/pat/books/201610224992.5/1.html,轉(zhuǎn)載請聲明來源鉆瓜專利網(wǎng)。





