[發明專利]一種黃樟油素型樟樹嫩枝組培繁殖方法

有效

• 申請號: 201610223065.1
• 申請日: 2016-04-12
• 公開（公告）號: CN105830924B
• 公開（公告）日: 2018-04-17
• 發明（設計）人: 安家成;蔡玲;黃金使;李開祥;梁曉靜;丘米;楊素華;黃宏喜
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區林業科學研究院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 廣西南寧匯博專利代理有限公司45114
• 代理人: 鄒超賢

技術領域

本發明屬于植物繁殖技術領域，涉及樟樹組織培養技術，尤其是涉及一種黃樟油素型樟樹嫩枝組培繁殖方法。

背景技術

黃樟油素型樟樹是樟科樟樹屬樟樹類的一種化學型樟樹（Cinnamomum camphora (L.)Presl）又名香樟，國家Ⅱ級保護植物，主要分布于江西、湖南、廣東、福建、海南、廣西、四川、臺灣等地，越南、韓國及日本也有分布。生長于丘陵及低山地帶。是一種集材用、油用、香精香料、藥用、風景園林等于一體的多用途優良樹種。黃樟油素具有樹木特有的香氣，是一種極為有用的天然香，是合成洋茉莉醛( Heliotropine) 、胡椒基丁醚( Piperonyl butoxide，PB) 、胡椒基丙酮( Ducinylrecryst) 、香蘭素( Vanillin) 等產品的理想原料，也是重要制藥中間體，廣泛用于輕化、香料、醫藥等工業生產中。隨著社會經濟的水平提高，生活質量的提升，人們回歸大自然意識的加強，以天然黃樟油素為原料合成的綠色原生態產品價格一路盤升，市場發展前景看好。傳統的黃樟油素從樹根、樹干中提取, 大量伐樹，挖根提油。這種“殺雞取卵，挖根取料”的方法，一方面破壞了生態環境，另一方面使資源不斷匱乏，不符合國家對自然資源永續利的要求。開發留主干，砍伐樟樹枝葉提取黃樟樹油素的方法，既可避免掠奪式利用黃樟樹油素原料資源，又有利于林地水土保持，培育樟樹珍貴大徑材，資源最大化的利用。

發明內容

本發明的目的是針對黃樟油素型樟樹組織培養過程中初代芽褐化或玻璃化嚴重至死，芽增殖系數低，生長緩慢等問題,提供一種生長效果好、擴繁快的黃樟油素型樟樹嫩枝組培繁殖方法。

為了實現上述發明目的，本發明的技術方案如下：

一種黃樟油素型樟樹嫩枝組培繁殖方法，其特征在于：包括外植體選擇、外植體處理、初始芽誘導培養、增殖培養、壯芽培養和生根培養工序，采集黃樟油素型樟樹的樹冠外圍生長健壯的當年生嫩枝作為外植體，對外植體進行修剪、滅菌消毒處理后接種于初始芽誘導培養基中獲取初始芽，再將初始芽接種于增殖培養基中經過4-5個周期增殖培養，形成叢生芽，將叢生芽接入壯芽培養基中培養，最后將高≥2cm的單芽插入生根培養基中誘導生根，具體操作步驟如下：

（1）外植體選擇：在至少連續3天晴朗的氣候里，采集黃樟油素型樟樹的樹冠外圍生長健壯的當年生嫩枝作為外植體；

（2）外植體處理：將外植體置于自來水下沖洗10-15 min，然后去除外植體葉片，再將外植體浸泡在體積濃度 0.1%的甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽溶液中，控制浸泡時間15-20 min，最后用純凈水洗凈藥物，將外植體裁成帶至少1個腋芽，1.5-3cm長的莖段，視莖段木質化程度分類置放容器內，對外植體消毒，備用；

（3）初始芽誘導培養：將步驟（2）得到的外植體接種于初始芽誘導培養基中培養，初始芽誘導培養方法為：首先將接種好的外植體置于4-8 ℃的低溫環境,暗培養8-10 d，再轉入溫度22-25 ℃,光照強度1000-2000 lux,光照10-12 h/d的條件下培養，培養40-50 d，初始芽萌發、生長；

（4）增殖培養：將高≥1cm的初始芽接入增殖培養基中進行增殖培養，增殖培養方法為：將接種好的初始芽置于溫度25-30 ℃，光照強度2000-3000 lux，光照12-14 h/d的條件下培養，35-40 d轉接一次，循環往復，經4-5個周期的培養，形成叢生芽；

（5）壯芽培養：將步驟（4）得到的叢生芽進行切割，4-5顆芽/叢，插入壯芽培養基中，置于溫度25-30 ℃，光照強度4000-7000 lux，光照12-14 h/d的環境中培養，培養35-40 d，形成壯芽；

（6）生根培養：將步驟（5）得到的高≥2cm的單芽插入常規的生根培養基中誘導生根；余下小芽叢再次接種于步驟（4）的增殖培養基中繼續增殖，然后再重復步驟（5），循環往復，獲得大量壯芽。

以上步驟（1）所述的黃樟油素型樟樹的選擇方法是：在林分、綠化帶或零星分布的樟樹中，選擇干型通直圓滿，樹冠枝葉茂盛，生長快，用鼻子聞樹木的葉片，樟木味道濃厚的單株,采其單株葉片回室內進行黃樟油素定量定性分析，葉片葉油得率1.5%以上，葉油黃樟油素含量90 %以上的植株確定為黃樟油素型樟樹。