[發明專利]一種外源基因DNA片段克隆到質粒載體相鄰或重疊的限制性內切酶酶切位點的方法有效
| 申請號： | 201610219972.9 | 申請日： | 2016-04-07 |
| 公開（公告）號： | CN105779481B | 公開（公告）日： | 2019-01-11 |
| 發明（設計）人： | 廖東慶;黃日波;李曉明;韋航;韋旭欽;王青艷 | 申請（專利權）人： | 南寧中諾生物工程有限責任公司 |
| 主分類號： | C12N15/66 | 分類號： | C12N15/66 |
| 代理公司： | 廣西南寧公平知識產權代理有限公司 45104 | 代理人： | 王素娥 |
| 地址： | 530003 廣西壯族*** | 國省代碼： | 廣西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 基因 dna 片段 克隆 質粒 載體 相鄰 重疊 限制性 內切酶酶切位點 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種外源基因DNA片段克隆到質粒載體重疊的限制性內切酶酶切位點的方法，其特征在于，操作步驟為：將質粒載體分別用限制性內切酶A\B及A\C進行雙酶切，膠回收后獲得AB、BA及AC、CA四個DNA片段；外源基因DNA片段用限制性內切酶B、C分步或雙酶切，得到BC片段；AB、BC、CA與AC、BC、BA這三個DNA片段分別進行連接、轉化，涂布在篩選平板上培養，再挑取單菌落進行篩選，可以得到外源基因連入質粒載體正反兩個方向的重組質粒。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，質粒載體上的限制性內切酶B、C為重疊的酶切位點。
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