[發明專利]一種基于黃牛Angptl8基因單核苷酸多態性的分子育種方法在審
| 申請號： | 201610217640.7 | 申請日： | 2016-04-03 |
| 公開（公告）號： | CN105671189A | 公開（公告）日： | 2016-06-15 |
| 發明（設計）人： | 馬云;付瑋瑋;李芬;郝瑞杰;李俊雅;陳寧博;黃潔萍;韓爽;劉云云 | 申請（專利權）人： | 信陽師范學院 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 464000 *** | 國省代碼： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 基于 黃牛 angptl8 基因 核苷酸 多態性 分子 育種 方法 | ||
1.一種基于黃牛Angptl8基因單核苷酸多態性的分子育種方法，其特征在 于，
以包含Angptl8基因的待測黃牛全基因組DNA為模板，以引物對P為引物， PCR擴增黃牛Angptl8基因，獲得PCR擴增產物；
用限制性內切酶HinfI消化PCR擴增產物，獲得酶切產物片段；
對酶切產物片段進行聚丙烯酰胺凝膠電泳；
根據聚丙烯酰胺凝膠電泳結果鑒定出黃牛Angptl8基因中第-308位具有單 核苷酸多態性，所述單核苷酸多態性為：TT基因型表現為148bp一條條帶； CC基因型表現為132bp和16bp兩條條帶；TC基因型表現為148bp、132bp 和16bp三條條帶；
分別分析TT基因型與黃牛生長性狀、CC基因型與黃牛生長性狀、TC基 因型與黃牛生長性狀的關聯性，得出TT基因型有利于黃牛生長性狀的提高；
將TT基因型作為提高黃牛生長性狀的分子遺傳標記，用于黃牛的分子育 種；
所述引物對P包括上游引物P1和下游引物P2，其中，
上游引物P1的堿基序列為：5′-GGGGCAGCTCCGGGTGAAT-3′；
下游引物P2的堿基序列為：5′-GGGCACTGGTGAGAGGATAGGC-3′。
2.根據權利要求1所述的分子育種方法，其特征在于，所述PCR擴增的 反應程序為：
95℃預變性5min；94℃變性30s，65℃退火30s，72℃延伸30s，30～35 個循環；72℃延伸10min。
3.根據權利要求1所述的分子育種方法，其特征在于，所述聚丙烯酰胺凝 膠電泳所用的聚丙烯酰胺凝膠中，聚丙烯酰胺的質量濃度是12％。
4.根據權利要求1所述的分子育種方法，其特征在于，將TT基因型作為 提高郟縣紅牛或南陽黃牛的生長性狀的分子遺傳標記。
5.根據權利要求4所述的分子育種方法，其特征在于，將TT基因型作為 提高郟縣紅牛的胸圍、腹圍、腰角寬以及十字部高性狀的分子遺傳標記。
6.根據權利要求4所述的分子育種方法，其特征在于，將TT基因型作為 南陽黃牛的體斜長性狀的分子遺傳標記。
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