[發明專利]一種可降解聚合物包載NBD多肽微球的制備方法

在審

• 申請號: 201610211199.1
• 申請日: 2016-04-05
• 公開（公告）號: CN107281111A
• 公開（公告）日: 2017-10-24
• 發明（設計）人: 余斌;屠美;王磊;楊勤夢;楊慎宇
• 申請（專利權）人: 南方醫科大學南方醫院
• 主分類號: A61K9/16
• 分類號: A61K9/16;A61K9/19;A61K38/08;A61K47/34;A61P29/00
• 代理公司: 廣州三環專利商標代理有限公司44202
• 代理人: 劉宇峰

技術領域

本發明屬于生物醫學領域，涉及一種藥物微球的制備方法，特別是涉及一種可降解聚合物包載NBD多肽微球的制備方法。

背景技術

在骨缺損臨床治療過程中，持續性炎癥和感染的存在將會引起術后骨感染灶的復發以致清創手術的失敗。大部分炎癥中炎性因子TNF-α扮演著重要角色，同時NF-кB是炎癥反應中關鍵的轉錄因子。NBD多肽是一種具有細胞膜穿透性的多肽，作為炎癥抑制劑能特異性阻斷NF-кB炎癥信號通路。但對于NBD多肽干預骨內感染，尚有以下問題有待解決：(1)NBD多肽在骨感染病灶中的給藥方式、給藥濃度及使用時間有待確定；(2)NBD多肽體內的半衰期短，局部應用很快被稀釋代謝，作為術后抗炎的關鍵，如何延長其在術區的持續作用時間，同時最大限度地降低其首過效應有待解決。

生物降解高分子緩釋微球給藥系統具有獨特的藥物保護作用及控制釋放特性，作為多肽、蛋白質類大分子藥物的傳輸載體，在延長藥物的活性，提高藥物穩定性等方面，具有比一般藥物制劑明顯的優越性。

常用的載藥微球的制備方法為復乳法(w/o/w)。該方法主要包括四個步驟：初乳的制備、復乳的形成、微球的固化以及微球的收集與洗滌。復乳法是研究時間最早、應用范圍最廣的一種微球制備方法，其工藝簡單，制備的微球載藥量在微球中分布較均勻。

但是，依照傳統的復乳法制備微球，容易造成微球粒徑分布不均一，包封率不穩定，制成的微球容易破裂變形等問題，這會導致藥物的大量流失，這對包括NBD多肽在內的貴重藥品，是一種嚴重的損失。

因此，有必要開發新的負載NBD多肽的載物微球。

發明內容

為了解決現有技術的缺點和不足，本發明的目的在于提供一種可降解聚合物 包載NBD多肽微球的制備方法，能制備粒徑大小均一，包封率穩定的微球，且制備工藝更穩定，可根據需要獲得各種形貌的微球。

本發明所述的可降解聚合物包載NBD多肽微球的制備方法，包括以下步驟：

A.由生物相容性良好的可降解聚合物的有機溶液與NBD多肽的水溶液組成的油包水乳化液，作為第一次乳化后的初乳液；

B.將所述初乳液注入注射器中，用醫用微量注射泵以一定速度推進所述注射器使所述初乳液注入到濃度為1％～6％的PVA剪切液中，轉入離心管中，置于攪拌機中攪拌，攪拌過程中在注射器與裝盛剪切液的容器外加冰浴，以保證NBD多肽不變性；攪拌機以一定速度轉動時帶動固定其上的鐵棍一起旋轉，從而帶動PVA溶液旋轉產生剪切作用，初乳液在旋轉液體的剪切力作用下逐漸拉長變細，分散為小球珠；乳化液形成的小球珠在PVA溶液中逐漸擴散，最后固化成大小均勻的微球；

C.初乳液注射完畢反應完成之后，將微球離心洗滌，將收集到的微球冷凍干燥。

根據本發明所述的可降解聚合物包載NBD多肽微球的制備方法的進一步特征，所述步驟A中，所述可降解聚合物是選自：聚羥基乙醇酸(PLGA)、聚己內酯(PCL)、聚乳酸(PLA)、羥基乙酸聚合物(GA)。

根據本發明所述的可降解聚合物包載NBD多肽微球的制備方法的進一步特征，所述步驟A中，所述有機溶液中的有機溶劑是選自：二氯甲烷(DCM)、三氯乙烯(TCE)、四氯乙烯(PCE)、四氫呋喃(THF)、丙酮或乙酸乙酯(EAC)。

根據本發明所述的可降解聚合物包載NBD多肽微球的制備方法的進一步特征，所述步驟A中，所述的可降解聚合物的有機溶液是聚羥基乙醇酸(PLGA)的二氯甲烷(DCM)溶液。優選地，所述PLGA的DCM溶液的濃度為2.5％～15％。

根據本發明所述的可降解聚合物包載NBD多肽微球的制備方法的進一步特征，所述步驟A中，所述NBD多肽的水溶液的濃度為1.24％～5％。

根據本發明所述的可降解聚合物包載NBD多肽微球的制備方法的進一步特征，所述步驟B中，將注射器固定于醫用微量注射泵上，針頭與注射器連接后伸入50ml離心管中，鐵棍固定于機械攪拌器上，同時鐵棍伸入50ml離心管中，在水平位置上，鐵棍底部低于針尖1-1.5cm。

根據本發明所述的可降解聚合物包載NBD多肽微球的制備方法的進一步特征，針管內徑為0.2～1mm，針頭與攪拌機的攪拌棒距離為0.1-0.3mm，針頭伸入PVA溶液液面以下0.5-5cm。

根據本發明所述的可降解聚合物包載NBD多肽微球的制備方法的進一步特征，攪拌機的轉速為1600-2000rad/min。