[發(fā)明專利]藍(lán)色4’,6-二脒基-2-苯基吲哚染料示蹤基因納米載體的制備方法及應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610209494.3
• 申請日: 2016-04-05
• 公開（公告）號: CN105779503A
• 公開（公告）日: 2016-07-20
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 常津;鄭斌;王漢杰;諶紅彬;胡鵬飛;潘慧卓
• 申請（專利權(quán)）人: 天津大學(xué)
• 主分類號: C12N15/87
• 分類號: C12N15/87
• 代理公司: 天津市北洋有限責(zé)任專利代理事務(wù)所 12201
• 代理人: 王麗

1.一種藍(lán)色4’,6-二脒基-2-苯基吲哚染料示蹤基因納米載體的制備方法；其特征步驟如下：

1)介孔二氧化硅納米顆粒的羧基化：稱取介孔二氧化硅納米顆粒用無水吡啶配制成1～ 100毫克每毫升的溶液，加入質(zhì)量比為1:3～1:30的丁二酸酐，在磁力攪拌條件下，攪拌反 應(yīng)6～12小時，得到羧基化的介孔二氧化硅納米顆粒；

2)介孔硅殼納米顆粒表面連接聚醚酰亞胺：將羧基化的介孔二氧化硅納米顆粒溶解于去 離子水中；加入質(zhì)量比為1:1～1:10，相對分子質(zhì)量為600的聚醚酰亞胺，并在磁力攪拌條 件下，攪拌反應(yīng)6～12小時；待反應(yīng)結(jié)束后，用去離子水洗滌沉淀1～3遍，得到可吸附DNA 的基因納米載體；

3)將藍(lán)色4’,6-二脒基-2-苯基吲哚染料染料包埋至介孔二氧化硅基因納米載體中并進(jìn) 行基因的細(xì)胞轉(zhuǎn)染：將基因納米載體配成1～10毫克每毫升的水溶液，然后加入與基因納米 載體的質(zhì)量比為1:2～1:20的藍(lán)色4’,6-二脒基-2-苯基吲哚染料，在磁力攪拌條件下，攪 拌反應(yīng)6～12小時；待反應(yīng)結(jié)束后，用去離子水洗滌沉淀1～3遍，得到實時跟蹤外源基因的 介孔二氧化硅基因納米載體。

2.如權(quán)利要求1所述的方法制備的藍(lán)色4’,6-二脒基-2-苯基吲哚染料示蹤基因納米載體， 其特征是：直徑為80～150納米，孔徑為0.5～2納米，載藥率為20～40％。

3.如權(quán)利要求1所述的方法制備的藍(lán)色4’,6-二脒基-2-苯基吲哚染料示蹤基因納米載體， 其基因轉(zhuǎn)染效率為40～70％，細(xì)胞存活率為80％～95％。

4.利用納米載體內(nèi)藍(lán)色4’,6-二脒基-2-苯基吲哚染料的分布情況來實時跟蹤基因所到達(dá)的 位置。