[發(fā)明專利]一種減少熒光衰減的封片劑

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610206674.6
• 申請日: 2016-04-06
• 公開（公告）號: CN105784661B
• 公開（公告）日: 2021-01-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉濤;王紅;郭喜;孫繼紅;陳愷;王國強(qiáng)
• 申請（專利權(quán)）人: 北京雷根生物技術(shù)有限公司
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明“一種減少熒光衰減的封片劑”，其特征是所述的減少熒光衰減的封片劑中包括如下組分：聚乙烯醇、甘油、重氮雙環(huán)辛烷、金屬離子螯合劑、碳酸鹽緩沖液、Tris?HCl緩沖液、防腐劑、水，既能用于自身能發(fā)出熒光的樣本或熒光染色后的樣本的封片以延緩樣本熒光的衰減程度，亦可用于常規(guī)染色后的封片。本發(fā)明還提供了所述的減少熒光衰減的封片劑的制備方法及封片方法，大大減緩各種熒光衰減或淬滅的程度，較普通抗熒光淬滅封片劑的抗淬滅效果大大增強(qiáng)。

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥應(yīng)用領(lǐng)域，具體涉及一種減緩熒光衰減或淬滅的封片劑及其制備、封片方法。

背景技術(shù)：

封片是將組織切片(亦可是血液涂片、細(xì)胞爬片等)封固保存于載玻片與蓋玻片之間，使之不與空氣發(fā)生接觸，防止其氧化、褪色，利于鏡檢觀察及保存。對于組織切片，完成染色后經(jīng)過脫水透明后，為了易于在顯微鏡下觀察，并能長時間保存?zhèn)洳椋枰梅馄瑒?又稱封固劑、封片介質(zhì)等)把染片封固起來，從而完成一張組織玻片標(biāo)本的制作。一般情況下，較好的封片劑具有如下特點(diǎn)：1、牢固的黏性；2、較好的折光性；3、折光率與玻片差距不大；4、能與透明劑相混合；5、中性，對染料無影響等。

目前，市面上常用的封片劑有兩大類：1、非水溶性膠：主要用于染色后經(jīng)無水乙醇脫水，二甲苯透明的染色片的封片。常用的有中性樹膠、加拿大樹膠、DPX合成樹脂等。2、水溶性膠：主要用于染色后不能經(jīng)無水乙醇脫水，二甲苯透明的染色片的封固。常用的水溶性膠有甘油明膠、阿拉伯糖膠以及進(jìn)口的專用水溶性膠等。

在生物學(xué)應(yīng)用領(lǐng)域，經(jīng)常需要用熒光染料對組織、細(xì)胞等樣本進(jìn)行熒光染色，在熒光顯微鏡下進(jìn)行觀察。熒光顯微鏡與普通光學(xué)顯微鏡不同，它不是通過普通光源的照明觀察樣本，而是利用一定波長的光(通常是紫外光、藍(lán)紫光)激發(fā)顯微鏡下標(biāo)本內(nèi)的熒光物質(zhì)，使之發(fā)射熒光，所以熒光顯微鏡的光源所起的作用不是直接照明，而是作為一種激發(fā)標(biāo)本的內(nèi)熒光物質(zhì)的能源。科研工作者之所以能觀察樣本，不是由于光源的照明，而是標(biāo)本內(nèi)熒光物質(zhì)吸收激發(fā)的光能后呈現(xiàn)的熒光現(xiàn)象。

由于熒光容易褪色，樣本作熒光染色后最好立即在熒光顯微鏡下觀察，當(dāng)時的熒光強(qiáng)度是最強(qiáng)的。但由于種種原因，樣本染色后不能及時觀察，需要用特殊介質(zhì)保存，以避免熒光減退。因此開發(fā)出一種減緩熒光衰減或淬滅的封片劑就顯得尤其重要。

發(fā)明內(nèi)容：

為了解決自身能發(fā)出熒光的樣本或熒光染色后的樣本的熒光易衰減或淬滅的問題，本發(fā)明“一種減少熒光衰減的封片劑”旨在提供一種減少熒光衰退的水溶性封片劑，能夠保存自身能發(fā)出熒光的樣本或熒光染色后的樣本，大大延緩樣本熒光的衰減程度，可以用于減緩各種常見熒光染料的熒光淬滅，較普通抗熒光淬滅封片劑的抗淬滅效果大大增強(qiáng)，一般3周后特異性熒光的強(qiáng)度才會有所減弱。

一種減少熒光衰減的封片劑，其特征是所述的每100ml封片劑中包括如下組分：聚乙烯醇0.1～6g；甘油8～30ml；重氮雙環(huán)辛烷1.5～5g；金屬離子螯合劑0.05～1g；碳酸鹽緩沖液15～40ml；Tris-HCl緩沖液15～30ml；防腐劑0.02g～1g；其余為水。

進(jìn)一步地，所述的聚乙烯醇與所述的重氮雙環(huán)辛烷的質(zhì)量比小于1.5。

進(jìn)一步地，所述的碳酸鹽緩沖液與所述的Tris-HCl緩沖液的體積比大于1。