[發明專利]一種減少熒光衰減的封片劑

有效

• 申請號: 201610206674.6
• 申請日: 2016-04-06
• 公開（公告）號: CN105784661B
• 公開（公告）日: 2021-01-01
• 發明（設計）人: 劉濤;王紅;郭喜;孫繼紅;陳愷;王國強
• 申請（專利權）人: 北京雷根生物技術有限公司
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種減少熒光衰減的封片劑，其特征在于，每100ml所述的減少熒光衰減的封片劑中包括如下組分：聚乙烯醇0.1～6g；甘油8～30ml；重氮雙環辛烷1.5～5g；金屬離子螯合劑0.05～1g；碳酸鹽緩沖液15～40ml；Tris-HCl緩沖液15～30ml；防腐劑0.02g～1g；其余為水；所述的重氮雙環辛烷是指1，4-重氮雙環-[2，2，2]辛烷，所述的聚乙烯醇與所述的重氮雙環辛烷的質量比小于1.5；所述的金屬離子螯合劑是指通過螯合劑分子與金屬離子的強結合作用將金屬離子包合到螯合劑內部變成穩定的分子量更大化合物的物質，可為EDTA、EDTA.2Na、EDTA.2K、EGTA的一種或多種的混合物。

2.根據權利要求1所述的一種減少熒光衰減的封片劑，其特征在于，所述的碳酸鹽緩沖液與所述的Tris-HCl緩沖液的體積比大于1，所述的水為蒸餾水或去離子水中的一種。

3.根據權利要求1所述的一種減少熒光衰減的封片劑，其特征在于，所述的聚乙烯醇為超高聚合度、高聚合度、中聚合度、低聚合度的聚乙烯醇的一種或多種的混合物，每100ml減少熒光衰減的封片劑選擇平均分子量為85,000～124,000的聚乙烯醇2.5～5g。

4.根據權利要求1所述的一種減少熒光衰減的封片劑，其特征在于，所述的甘油是指無熒光的分析純及以上級別的甘油。

5.根據權利要求1所述的一種減少熒光衰減的封片劑，其特征在于，所述的碳酸鹽緩沖液是指主要由碳酸氫鹽、碳酸鹽、水組成的緩沖液，其碳酸鹽總濃度為0.05～0.2mol/L，其pH值在8.0～9.5，所述的碳酸氫鹽是碳酸氫鈉、碳酸氫鉀的一種或二種的混合物，所述的碳酸鹽是碳酸鈉、碳酸鉀的一種或二種的混合物，所述的水為蒸餾水或去離子水中的一種，采用鹽酸調節至所需pH值；所述的Tris-HCl緩沖液是指由Tris、HCl、水組成的緩沖液，其Tris濃度為0.1～0.5mol/L，其pH值在7.5～9.5，所述的HCl為分析純(AR)以上級別的HCl，所述的水為蒸餾水或去離子水中的一種，采用鹽酸調節至所需pH值。

6.根據權利要求1所述的一種減少熒光衰減的封片劑，其特征在于，所述的防腐劑為疊氮鈉、甲醛、氯仿的一種或多種的混合物。

7.根據權利要求1所述的一種減少熒光衰減的封片劑，其特征在于，所述的減少熒光衰減的封片劑的制備方法包括如下步驟：按選定的濃度取適量的碳酸氫鹽和碳酸鹽，加入適量的蒸餾水或去離子水，充分溶解，用HCl調節pH至所需的值，即獲得碳酸鹽緩沖液；按選定的濃度取適量的Tris，加入適量的蒸餾水或去離子水，充分溶解，用HCl調節pH至所需的值，即獲得Tris-HCl緩沖液；取適量的上述配制好的碳酸鹽緩沖液和配制好的Tris-HCl緩沖液，充分混勻后，按選定的質量分數取聚乙烯醇加入混勻后的碳酸鹽緩沖液和Tris-HCl緩沖液的混合液中，再取適量的甘油、重氮雙環辛烷、防腐劑依次加入，補蒸餾水或去離子水至恰當體積，持續攪拌4～8h，8000～12000g離心1～2h，吸取上清，即獲得減少熒光衰減的封片劑。

8.根據權利要求1所述的一種減少熒光衰減的封片劑，其特征在于，所述的減少熒光衰減的封片劑的封片方法包括如下步驟：取待封片的樣本滴加適量的減少熒光衰減的封片劑，將玻片稍微傾斜，將蓋玻片順著載玻片斜面輕放或直接用封片劑封片。

9.根據權利要求1所述的一種減少熒光衰減的封片劑，其特征在于，所述的減少熒光衰減的封片劑應用于動物、植物、細菌、真菌、培養細胞的封固，用于封片樣本的類型有石蠟切片、冰凍切片、血液涂片、細胞爬片、培養細胞以及細胞涂片；所述的減少熒光衰減的封片劑用于自身能發出熒光的樣本或熒光染色后的樣本的封片，用于常規染色后的封片；所述的減少熒光衰減的封片劑應用于手工封片、半自動封片、全自動封片。

10.根據權利要求1所述的一種減少熒光衰減的封片劑，其特征在于，所述的減少熒光衰減的封片劑應用于熒光顯微鏡分析、普通顯微鏡分析、電鏡分析；所述的減少熒光衰減的封片劑應用于臨床檢測試劑、科研試劑以及生命科學試劑。