[發明專利]一種用于檢測循環腫瘤細胞侵襲力的試劑盒有效
| 申請號： | 201610206075.4 | 申請日： | 2016-04-05 |
| 公開（公告）號： | CN105675870B | 公開（公告）日： | 2017-08-04 |
| 發明（設計）人： | 李靜;陳昌岳;蔡紅東;鄧文斌;甘廣利;張祥林 | 申請（專利權）人： | 上海美吉生物醫藥科技有限公司 |
| 主分類號： | C12N15/11 | 分類號： | C12N15/11;C12Q1/68;G01N33/574 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 201321 上海市浦東新*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 用于 檢測 循環 腫瘤 細胞 侵襲 試劑盒 | ||
1.一種用于檢測循環腫瘤細胞侵襲力的試劑盒，其特征在于：它包括：
由CD133、CD24和CD44抗體各自獨立的與不同的寡核苷酸偶聯得到的抗體-寡核苷酸探針；
用于將上述抗體-寡核苷酸探針進行PCR擴增的擴增引物及緩沖液；
還包括熒光探針；
所述寡核苷酸的長度為16-22nt，5’端為6-14nt長度的引物識別序列，3’端用延伸引物進行延伸擴展；
所述延伸引物的長度為50-80nt，它的3’端末端與寡核苷酸的3’端互補配對，5’端可以形成發卡結構，且中間序列與熒光探針的序列互補；
所述寡核苷酸的序列為SEQ ID NO：1-3中所示的任一個；
所述循環腫瘤細胞為宮頸癌、乳腺癌或前列腺癌循環腫瘤細胞中的一種或多種。
2.根據權利要求1所述的用于檢測循環腫瘤細胞侵襲力的試劑盒，其特征在于：所述抗體-寡核苷酸探針包括寡核苷酸探針部分和抗體部分；所述寡核苷酸探針部分是將寡核苷酸的5'端進行醛基修飾后得到的，所述抗體部分是將抗體進行肼基修飾后得到的；所述寡核苷酸探針部分和所述抗體部分經過偶聯得到所述抗體-寡核苷酸探針。
3.根據權利要求2所述的用于檢測循環腫瘤細胞侵襲力的試劑盒，其特征在于：所述寡核苷酸探針部分是將5’端帶有氨基修飾的寡核苷酸，用摩爾當量為5-20倍的SFB進行醛基修飾后得到的；所述抗體部分是將抗體用摩爾當量為10-30倍的SANH進行肼基修飾后得到的。
4.根據權利要求1所述的用于檢測循環腫瘤細胞侵襲力的試劑盒，其特征在于：所述抗體-寡核苷酸探針是將摩爾比為(7-10):1的寡核苷酸探針部分和抗體部分，在室溫條件下反應12-24小時后得到的。
5.根據權利要求1所述的用于檢測循環腫瘤細胞侵襲力的試劑盒，其特征在于：所述擴增引物中包括一對用于將抗體-寡核苷酸探針進行PCR擴增的正向、反向引物，所述正向引物的5’端與寡核苷酸互補。
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