[發明專利]細胞分裂周期相關蛋白2在胰腺癌診斷或預后中的用途

有效

• 申請號: 201610195924.0
• 申請日: 2016-03-31
• 公開（公告）號: CN105785004B
• 公開（公告）日: 2017-11-10
• 發明（設計）人: 趙玉沛;王夢一;廖泉;周立;牛哲禹;張太平;戴夢華;胡亞;由磊;徐強;舒紅
• 申請（專利權）人: 中國醫學科學院北京協和醫院
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574
• 代理公司: 北京戈程知識產權代理有限公司11314
• 代理人: 程偉,程云

技術領域

本申請涉及醫學、臨床診斷領域。具體而言，涉及一種細胞分裂周期相關蛋白2作為標記物在癌癥診斷或預后方面的用途。

背景技術

胰腺癌是一種惡性程度很高，并且診斷和治療都很困難的消化道惡性腫瘤。約90％的胰腺癌起源于腺管上皮的導管腺癌。

根據胰腺癌發生的部位，胰腺癌分類有：1)胰頭癌；2)胰體尾癌；3)全胰腺癌。

根據胰腺癌病理類型，胰腺癌分類有：

1)導管腺癌，導管腺癌占胰腺癌的80％至90％，主要由分化不同程度的導管樣結構的腺體構成；

2)特殊類型的導管起源的癌，有以下幾種：多形性癌、腺鱗癌、粘液癌、粘液表皮樣癌和印戒細胞癌、纖毛細胞癌；

3)腺泡細胞癌，占1％，腫瘤細胞呈多角形、圓形或矮柱形；

4)小腺體癌；

5)小細胞癌，胰腺的小細胞癌形態上與肺小細胞癌相似，約占胰腺癌的1％至3％。

胰腺導管腺癌發病隱匿、進展快、預后極差。最新資料表明，胰腺導管腺癌的發病率逐年攀升，發病率和病死率均居美國人群第四位，5年存活率約8％[1]，超過50％的患者初診時已失去手術機會。因此，尋找胰腺導管腺癌分子治療的靶點是目前的研究熱點，進而對提高胰腺導管腺癌患者的治療效果具有很大的社會效益[2-3]。

目前，關于胰腺導管腺癌相關的基因組學報道較少，這與胰腺導管腺癌特有的病理特征有關，其腫瘤組織中的大多數成分為腫瘤間質，很難直接提取腫瘤的DNA進行測序。

細胞分裂周期相關蛋白2(Cell division cycle associated 2，CDCA2)又稱Repo-Man(Recruits PP1onto mitotic chromatin at anaphase)，是蛋白磷酸酶1的一個結合亞基，參與組蛋白H3在有絲分裂結束時脫磷酸作用的過程[4]。

在細胞內，CDCA2蛋白具有兩項重要作用。一是參與有絲分裂，二是參與DNA損傷修復。細胞有絲分裂的過程中，CDCA2蛋白存在與細胞核內。由于受到Cyclin B-CDK1復合體磷酸化，使CDCA2蛋白不能與PP1γ結合，而不能與染色體向結合，無法發揮其作用。在有絲分裂后期，作為蛋白磷酸酶1γ的調節亞基，CDCA2蛋白將PP1γ募集到組蛋白H3上，促使復制好的染色體分離。這一過程還要受到蛋白激酶Aurora B的調節，來保證在DNA還沒復制好的時候，CDCA2蛋白不能結合到組蛋白H3上而無法發揮作用[5]。此外，CDCA2蛋白還通過協調細胞核膜的重塑來參與有絲分裂時細胞核的重建。通過RNA干擾技術降低細胞中CDCA2蛋白表達時，不僅會使染色質的復制出現異常，還會出現異常畸形的細胞核[6-7]。

已有的實驗證實，CDCA2蛋白在乳腺癌、結腸癌、卵巢癌、口腔鱗癌的癌組織中均高表達，表達高于癌旁組織。在口腔鱗癌中，免疫組化結果顯示CDCA2蛋白的表達與T分期和腫瘤分期相關[8]，這與CDCA2蛋白的生物學功能相符。目前尚未發現關于CDCA2在胰腺導管腺癌中作用的相關研究報道。

考慮到胰腺癌發病隱匿、進展快且預后極差，本領域仍需一種準確、靈敏、特異的標記物用于輔助胰腺癌的診斷或預后。

發明內容

鑒于本領域中的上述需求，本公開的一些實施方式提供了確定受試者樣本中CDCA2表達水平的試劑在制備胰腺癌診斷或預后試劑盒中的用途。

在一些實施方式中，胰腺癌選自：胰頭癌、胰體癌、胰尾癌和全胰腺癌。在另一些實施方式中，胰腺癌選自：胰腺導管腺癌、多形性胰腺癌、腺鱗癌、胰腺粘液癌、胰腺粘液表皮樣癌和印戒細胞癌、胰腺纖毛細胞癌、腺泡細胞癌、胰腺小腺體癌和胰腺小細胞癌。

在具體的實施方式中，提供了確定受試者樣本中CDCA2表達水平的試劑在制備胰腺導管腺癌診斷或預后試劑盒中的用途。

在一些實施方式中，在基因水平確定CDCA2的表達水平。當在基因水平確定CDCA2的表達水平時，可用的試劑是探針或引物對。技術人員根據CDCA2的核苷酸序列可以自行制備特異性的探針或引物對。

在另一些實施方式中，在蛋白水平確定CDCA2的表達水平。當在蛋白水平確定CDCA2的表達水平時，可用的試劑是抗CDCA2抗體。多克隆抗體或單克隆抗體均可用于實施本公開的技術方案。在具體的實施方式中，利用免疫組化的原理，采用抗CDCA2單克隆抗體確定CDCA2的表達水平。