[發(fā)明專利]ITS序列作為DNA條形碼在鑒定嘉興槜李中的應(yīng)用及鑒定方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201610186877.3 | 申請日： | 2016-03-29 |
| 公開（公告）號： | CN105671185B | 公開（公告）日： | 2019-02-05 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 李軍;李白;李斌 | 申請（專利權(quán)）人： | 浙江省嘉興市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院（所） |
| 主分類號： | C12Q1/6895 | 分類號： | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司： | 杭州天勤知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 33224 | 代理人： | 沈自軍 |
| 地址： | 314016 浙*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | its 序列 作為 dna 條形碼 鑒定 嘉興 中的 應(yīng)用 方法 | ||
1.ITS序列作為DNA條形碼在鑒定嘉興槜李中的應(yīng)用，所述ITS序列的堿基序列如SEQID NO.1或SEQ ID NO.2所示。
2.ITS序列作為DNA條形碼在制備鑒定嘉興槜李試劑盒中的應(yīng)用，所述ITS序列的堿基序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示。
3.一種鑒定嘉興槜李的方法，包括以下步驟：
利用PCR擴(kuò)增待測樣品的ITS序列并進(jìn)行測序，如果ITS序列的165bp堿基為“T”、195bp堿基為“T”，則判定待測樣品為嘉興槜李；
所述PCR擴(kuò)增的引物對為：
上游引物：5’-GCCTAGCAGAACGACCCGAG-3’，
下游引物：5’-GACGTGTGACGCCCAGGCA-3’；
所述PCR擴(kuò)增的反應(yīng)體系為：
10×PCR緩沖液，2μL；dNTP混合液，0.5μL；10μM上游引物，0.5μL；10μM下游引物，0.5μL；樣品DNA，1μL；Taq DNA聚合酶，0.2μL；補充無菌水至20μL；
所述PCR擴(kuò)增的反應(yīng)條件為：
94℃預(yù)變性5min；94℃變性30s，56℃退火30s，72℃延伸30s，共36個循環(huán)；72℃延伸10min；4℃保溫5min。
4.一種鑒定嘉興槜李的DNA條形碼，其特征在于，堿基序列如SEQ ID NO.1或SEQ IDNO.2所示。
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