[發(fā)明專利]基于核酸適體熒光探針AFP3的甲胎蛋白試劑盒及其檢測(cè)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610184376.1
• 申請(qǐng)日: 2016-03-25
• 公開（公告）號(hào): CN105785034B
• 公開（公告）日: 2017-10-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張燕;夏昊強(qiáng);周煌凱;陶勇;高川;馬衛(wèi)紅;陳飛欽
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣州大學(xué)城健康產(chǎn)業(yè)科技園投資管理有限公司
• 主分類號(hào): C12N15/11
• 分類號(hào): C12N15/11;G01N33/68
• 代理公司: 北京高航知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司11530
• 代理人: 趙永強(qiáng)

1.一種基于核酸適體熒光探針的甲胎蛋白試劑盒，其特征在于，主要成分包括：含NH₄Cl、Tris、EDTA-Na₂的紅細(xì)胞裂解液；含 MgCl₂的0.2M磷酸緩沖液；甲胎蛋白標(biāo)準(zhǔn)品；甲胎蛋白核酸適體熒光探針；所述甲胎蛋白核酸適體熒光探針為5'和3'兩端分別標(biāo)記熒光芘分子單體的核苷酸單鏈，該核苷酸單鏈序列為：gagctctgac tcgctaaggt cgtcatggag gtggataact ggatccaacc acctatgga；所述的甲胎蛋白核酸適體熒光探針不與甲胎蛋白結(jié)合時(shí)，核酸適體處于比較松散的結(jié)構(gòu)，5'和3'兩端的芘分子單體相互游離，熒光激發(fā)后發(fā)射波長(zhǎng)在 370~400nm之間；所述的甲胎蛋白核酸適體熒光探針與甲胎蛋白結(jié)合時(shí)，甲胎蛋白誘導(dǎo)其發(fā)生結(jié)構(gòu)改變，核酸適體5'和3'兩端的芘分子單體相互靠近，形成激發(fā)態(tài)二聚體，熒光激發(fā)后激發(fā)態(tài)二聚體發(fā)射波長(zhǎng)在 480~500nm之間。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于核酸適體熒光探針的甲胎蛋白試劑盒，其特征在于，所述含NH₄Cl、Tris、EDTA-Na₂的紅細(xì)胞裂解液含有1~280mmol/L NH₄Cl，1~34mmol/L Tris，1~2mmol/L EDTA-Na₂，pH7.0~7.2；所述含MgCl₂的0.2M磷酸緩沖液含有1~10mmol/L MgCl₂。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種基于核酸適體熒光探針的甲胎蛋白試劑盒，其特征在于，所述含NH₄Cl、Tris、EDTA-Na₂的紅細(xì)胞裂解液、含 MgCl₂的0.2M磷酸緩沖液、甲胎蛋白標(biāo)準(zhǔn)品、甲胎蛋白核酸適體熒光探針為配制好直接使用的液體試劑或是使用前需加水溶解的干粉狀態(tài)。

4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種基于核酸適體熒光探針的甲胎蛋白試劑盒，其特征在于，該試劑盒用于檢測(cè)肝素抗凝全血或末梢血中的甲胎蛋白濃度。