[發明專利]用于果蔬中敵草快拉曼增強光譜法及其試劑配方

在審

• 申請號: 201610183767.1
• 申請日: 2016-03-28
• 公開（公告）號: CN107238593A
• 公開（公告）日: 2017-10-10
• 發明（設計）人: 鄒明強;齊小花;盧春梅;王紀平;吳渺渺
• 申請（專利權）人: 中檢國研（北京）科技有限公司
• 主分類號: G01N21/65
• 分類號: G01N21/65
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明是關于一種農藥類殘留物的快速檢測技術，尤其涉及水果和蔬菜中敵草快現場快速檢測的拉曼光譜法、試劑配方及使用方法。

背景技術

食品安全是一項關于國計民生的“民心工程”，直接關系到廣大人民群眾的身體健康和生命安全。而且，食品安全事件波及面廣，尤其在農業生產中施用農藥后，一部分農藥直接或間接殘留于谷物、蔬菜、果品、畜產品、水產品以及土壤和水體中，對人類健康安全乃至生活環境構成越來越嚴重的威脅。因此，能夠安全、快速、有效的檢測出瓜果蔬菜等農產品的農藥殘留技術成為科研工作者共同關注的問題。

敵草快，純品為無色至淡黃色結晶，又名利農，一般用于傳導性觸殺滅生性除草劑，可迅速被綠色植物組織吸收，與土壤接觸后很快失去活性，用于大田、果園、非耕地、收割前等除草，也可以用作馬鈴薯和地瓜的莖葉催枯。毒理學資料表明敵草快屬中等毒類除草劑，其二溴化物對人的致死量約為6～12g，敵草快在胃腸道受細菌作用而降解，故其經胃腸道吸收少，吸收后隨血流分布至全身器官、組織，其中以肝、腎濃度較高。其代謝產物的毒性較其原形低，腸道微生物對代謝起主要作用。主要通過腎臟排泄，亦有相當量通過膽汁排泄。因此，使用過敵草快的瓜果蔬菜中含有的農藥殘留會對人身體造成嚴重損害。目前常用檢測敵草快的方法有氣相色譜法、液相色譜法、毛細管電泳法、方波伏安法及這些方法與質譜的聯用技術等。氣相色譜/質譜法和液相色譜/質譜法是我們國家推薦的標準方法，而常規色譜法都需要繁瑣耗時的樣品前處理過程，且分析時間長。

表面增強拉曼散射(SERS)通常發生在粗糙的金、銀等貴金屬表面。SERS的電磁場增強機理認為，當入射激光照射到貴金屬表面時，表面等離子體會被激發而導致局域電場的增強，最終引起拉曼散射的極大增強。因此，當分子吸附或非常接近具有SERS活性的基底表面時，分子的拉曼信號會被極大地增強。SERS檢測技術由于具有靈敏度高、檢測速度快、檢測限極低及能夠實現無損分析等優點已發展成為一種被廣泛應用于表面科學、分析科學以及生命科學等領域的有力工具。

本文提出了一種利用SERS技術檢測敵草快含量的方法，該方法操作過程簡單，檢測速度快，最低檢測限可以達到10^－8mol/L，有望發展成為一種應用于敵草快及其它類似農藥殘留檢測的常用方法。

發明內容

本發明的目的是提供一種水果和蔬菜中殘留敵草快的快速檢測方法，采用提取技術和表面增強拉曼散射對水果和蔬菜中殘留敵草快進行快速檢測，成本低廉，可現場應用。

為適應上述需求，本發明提供簡單的水果和蔬菜(如草莓、白菜等)前處理方法，提供檢測試劑配方及其制備方法，提供敵草快現場快速檢測的定性和定量分析方法。其步驟如下：

1.提取：用去離子水作為試樣提取試劑，將蔬菜或水果打碎成漿汁狀，準確稱取試樣3.0g，加入3mL去離子水旋窩混勻，于離心機中在8000～10000rpm下離心5～10min，吸取離心后的上層清液，用0.22μm濾膜過濾，取濾液待測。

2.檢測：將濾液加入至預先加好一定量試劑A和B的檢測池中，渦旋或搖振均勻，置于便攜式拉曼快檢儀檢測室中進行拉曼光譜掃描，采集拉曼光譜圖，拉曼譜圖中如在1593cm^-1(波數誤差<10cm^-1)處有特征峰，則判斷樣品添加了敵草快，反之則判定樣品沒有添加敵草快。本發明的拉曼增強光譜法，所述水均為二次蒸餾水或去離子水。

3.試劑：A為銀膠體水溶液，按照公知的方法制備即可；試劑B為可使A凝聚的含Cl^-的電介質，Cl^-濃度范圍為0.1M～1M；pH為3-14。所述試劑的用量如下：(1)試劑A：100-300μL；(2)試劑B：100-300μL；(3)試樣濾液：100-500μL。

4.儀器：本發明所述便攜式拉曼快檢儀的激光光源發射波長為785nm。目前，中國檢驗檢疫科學研究院、中檢國研(北京)科技有限公司、必達泰克公司可提供滿足測試要求的便攜式拉曼光譜儀。

利用本發明時，后期的數據采集及結果分析步驟如下：