[發明專利]一種用于內耳毛細胞定向轉染的納米基因載體復合物及其制備方法在審
| 申請號： | 201610182762.7 | 申請日： | 2016-03-28 |
| 公開（公告）號： | CN107236760A | 公開（公告）日： | 2017-10-10 |
| 發明（設計）人： | 吳南;楊仕明;王方園;鄧雄威;吳雁;陳志婷 | 申請（專利權）人： | 中國人民解放軍總醫院 |
| 主分類號： | C12N15/85 | 分類號： | C12N15/85;A61K48/00;A61P27/16 |
| 代理公司： | 北京方安思達知識產權代理有限公司11472 | 代理人： | 王宇楊,陳琳琳 |
| 地址： | 100853*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 用于 內耳 細胞 定向 轉染 納米 基因 載體 復合物 及其 制備 方法 | ||
1.一種用于內耳毛細胞定向轉染的納米基因載體復合物，其特征在于，所述納米基因載體復合物包括由透明質酸修飾的PEI載體以及由所述載體運載的Atoh1基因。
2.根據權利要求1所述的納米基因載體復合物，其特征在于，所述PEI載體為25kDa的bPEI納米顆粒。
3.根據權利要求1所述的納米基因載體復合物，其特征在于，所述Atoh1基因為小鼠來源。
4.一種權利要求1-3任一所述納米基因載體復合物的制備方法，包括以下步驟：
1)納米基因載體復合物的制備：將Atoh1質粒及PEI納米顆粒混溶于無酶去離子水中，獲得PEI/Atoh1復合物；
2)納米基因復合物的修飾：將PEI/Atoh1復合物加入透明質酸溶液中，反應后即獲得納米基因復合物。
5.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，步驟1)按照N/P＝10:1將Atoh1質粒及PEI納米顆粒混溶于無酶去離子水中，保持溶液pH＝7.2-7.6。
6.根據權利要求4或5所述的制備方法，其特征在于，步驟2)按照COOH/N/P＝4:10:1將PEI/Atoh1復合物加入透明質酸溶液中。
7.根據權利要求4-6任一所述的制備方法，其特征在于，步驟1)將Atoh1質粒及PEI納米顆粒混溶于無酶去離子水后，反復吹打20-30次，室溫下反應20-30分鐘。
8.根據權利要求4-6任一所述的制備方法，其特征在于，步驟2)將PEI/Atoh1復合物加入透明質酸溶液后，反復吹打20-30次，室溫下反應20-30分鐘。
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