[發明專利]測量液體樣品中細菌含量的方法

在審

• 申請號: 201610178405.3
• 申請日: 2016-03-25
• 公開（公告）號: CN107228943A
• 公開（公告）日: 2017-10-03
• 發明（設計）人: 孫冰;王林;石寧;趙磊
• 申請（專利權）人: 中國石油化工股份有限公司;中國石油化工股份有限公司青島安全工程研究院
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569
• 代理公司: 上海碩力知識產權代理事務所(普通合伙)31251
• 代理人: 王法男

1.一種測量液體樣品中細菌含量的方法，在液體樣品中細菌含量測量裝置上，進行液體樣品中細菌含量的測量；所述裝置包括箱體、試劑管放置位置、試劑管、觀察孔以及細菌富集和蛋白質分子捕捉設備，所述細菌富集和蛋白質分子捕捉設備包括濾膜、吸附層、至少兩個廢液池、至少兩個閥門，所述試劑管放置位置位于箱體頂部，底部與濾膜上方空間連通，濾膜下方空間分為兩路，一路與閥門(5a)入口端相連，另一路與閥門(5b)入口端相連，閥門(5a)出口端與吸附層入口側通過管道相連，吸附層出口側的管道伸入廢液池(4a)中，閥門(5b)出口端的管道伸入廢液池(4b)中，濾膜上方空間的頂部設有金屬尖刺，當試劑管放置在試劑管放置位置上時可以刺破試劑管底部的鋁箔；設置至少八個試劑管，其中：試劑管(a)為空管，用以待裝樣品，試劑管(b)和試劑管(c)內盛裝濾膜沖洗液，試劑管(d)內盛裝細菌裂解液，試劑管(e)和試劑管(f)內盛裝吸附層沖洗液，試劑管(g)內盛裝帶有染料分子的特異性抗體溶液，試劑管(h)內盛裝吸附層沖洗液；所述觀察孔位于吸附層正上方，開孔在箱體頂部；當試劑管放置在試劑管放置位置上時，在試劑管上部放置活塞，將試劑管中的試劑向下壓入濾膜上方的空間中；液體樣品中細菌含量的測量步驟包括：

(1)在試劑管(a)中裝入樣品，放置于試劑管放置位置，試劑管底部鋁箔包裝被下部金屬尖刺破，液體流入濾膜上方，小于濾膜孔徑的液體穿過濾膜后進入廢液池(4b)；

(2)當試劑管(a)中的樣品全部流過濾膜后，先后在試劑管放置位置上更換為試劑管(b)、試劑管(c)，重復(1)的操作，對濾膜進行沖洗；

(3)對濾膜的沖洗完成后，在試劑管放置位置上更換為試劑管(d)，重復(1)的操作，將試劑管(d)中的細菌裂解液流經吸附層后進入廢液池(4a)；

(4)在試劑管放置位置上更換為試劑管(e)、試劑管(f)進行沖洗，移除細菌裂解液中的雜質；

(5)沖洗結束后，在試劑管放置位置上更換為試劑管(g)，重復(3)的操作；

(6)在試劑管放置位置上更換為試劑管(h)，通過試劑管(h)中的溶液進行沖洗掉多余的抗體；

(7)通過觀察孔觀察吸附層的顏色，與比色卡比較，讀出對應濃度。

2.根據權利要求1所述測量液體樣品中細菌含量的方法，其特征在于所述試劑管頂部由鋁箔封裝，使用前撕掉試劑管上方的鋁箔。

3.根據權利要求1所述測量液體樣品中細菌含量的方法，其特征在于所述通過選擇不同的試劑管，實現所述設備的樣品富集、捕捉、沖洗操作。

4.根據權利要求1所述測量液體樣品中細菌含量的方法，其特征在于細菌富集和蛋白質分子捕捉設備集成在所述箱體內。

5.根據權利要求1所述測量液體樣品中細菌含量的方法，其特征在于當樣品為水相物質時，采用親水性濾膜，濾膜尺寸在0.5微米以下，以確保目標微生物能夠保留在濾膜上；當樣品為油相物質時，采用親油性濾膜。

6.根據權利要求1所述測量液體樣品中細菌含量的方法，其特征在于吸附層的材質為特異性吸附蛋白質的材料、不同截留分子量的超濾膜。

7.根據權利要求1所述測量液體樣品中細菌含量的方法，其特征在于染料分子通過抗體與腺苷-5’-磷酸硫酸鹽還原酶APS特異性結合，染料分子的數量與APS成正比。