[發明專利]一種快速無掩模的細胞二維圖形化制作方法在審
| 申請號： | 201610167948.5 | 申請日： | 2016-03-23 |
| 公開（公告）號： | CN107227297A | 公開（公告）日： | 2017-10-03 |
| 發明（設計）人： | 劉連慶;楊文廣;于海波;王越超 | 申請（專利權）人： | 中國科學院沈陽自動化研究所 |
| 主分類號： | C12N5/09 | 分類號： | C12N5/09 |
| 代理公司： | 沈陽科苑專利商標代理有限公司21002 | 代理人： | 徐麗,周秀梅 |
| 地址： | 110016 *** | 國省代碼： | 遼寧;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 快速 無掩模 細胞 二維 圖形 制作方法 | ||
1.一種快速無掩模的細胞二維圖形化制作方法，其特征在于，包括以下步驟：
將設計的二進制圖形導入到數字微鏡陣列中，并將聚乙二醇二丙烯酸甲酯PEGDA與光引發劑2,4,6-三甲基苯甲酰基-二苯基氧化膦TPO的混合溶液滴在蓋玻片表面；
數字微鏡陣列將紫外入射光投影到蓋玻片表面；
調整紫外入射光的功率，激發混合溶液發生交聯反應并固化粘附在蓋玻片表面，使固化后的水凝膠形狀與設計圖形的形狀和光斑形狀一致；
將蓋玻片經過酒精浸泡和磷酸鹽緩沖液沖洗后，放入細胞培養皿中，并加入細胞培養基和細胞懸浮液，將細胞培養皿放入二氧化碳恒溫細胞培養箱中進行培養。
2.根據權利要求1所述的一種快速無掩模的細胞二維圖形化制作方法，其特征在于，所述混合溶液為使用75％的酒精配置的聚乙二醇二丙烯酸酯PEGDA和光引發劑TPO混合溶液，PEGDA的濃度為40％，TPO的濃度為0.5wt％。
3.根據權利要求1或2所述的一種快速無掩模的細胞二維圖形化制作方法，其特征在于，所述混合溶液的制備方法包括以下步驟：
將PEGDA溶于酒精之中，待攪拌均勻后再加入光引發劑TPO，PEGDA的最終濃度為40％，TPO的濃度為0.5wt％。
4.根據權利要求1所述的一種快速無掩模的細胞二維圖形化制作方法，其特征在于，所述將蓋玻片經過酒精浸泡和磷酸鹽緩沖液沖洗，包括以下步驟：
將帶有固化后的PEGDA水凝膠微結構的蓋玻片放入75％的酒精中，清洗掉未反應的水凝膠；
將酒精清洗后蓋玻片放入磷酸鹽緩沖液中，進行二次清洗，除去附著在表面的酒精。
5.根據權利要求1所述的一種快速無掩模的細胞二維圖形化制作方法，其特征在于，所述蓋玻片為玻璃。
6.根據權利要求1所述的一種快速無掩模的細胞二維圖形化制作方法，其特征在于，所述細胞培養基為Hyclone RPMI-1640，加入量為7-10ml。
7.根據權利要求1所述的一種快速無掩模的細胞二維圖形化制作方法，其特征在于，所述細胞懸浮液為100μl乳腺癌細胞(MCF-7)濃度為3×106細胞懸浮液。
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