[發(fā)明專利]一種能夠及時觀察小麥黑胚病癥狀的接種鑒定方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610167059.9
• 申請日: 2016-03-23
• 公開（公告）號: CN105660222B
• 公開（公告）日: 2019-04-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李巧云;姜玉梅;牛吉山;梁曉龍;孫玉龍;何瑞士;朱欣欣;于東艷
• 申請（專利權(quán)）人: 河南農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號: C12Q1/04
• 分類號: C12Q1/04;A01G7/06
• 代理公司: 鄭州大通專利商標(biāo)代理有限公司 41111
• 代理人: 李秋紅

本發(fā)明公開了一種能夠及時觀察小麥黑胚病癥狀的接種鑒定方法。首先在小麥抽穗后，對小麥穗部進(jìn)行剪殼處理以及對去殼后的小麥穗部進(jìn)行雜菌隔離；將小麥黑胚病致病菌接種于含有PDA培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中進(jìn)行暗培養(yǎng)，得到培養(yǎng)后的致病菌菌落；沖洗得到的致病菌菌落，經(jīng)過濾、離心、調(diào)整孢子濃度后得到孢子懸浮液備用；在小麥籽粒滿仁時，將孢子懸浮液噴灑在剪殼處理的穗子上，并用塑料袋將穗子罩上保濕；接菌后觀察接種處理籽粒上病菌的侵染情況以及籽粒黑胚病癥狀的形成；小麥成熟時統(tǒng)計(jì)黑胚率，作為小麥黑胚病鑒定的結(jié)果。本發(fā)明方法不僅可以及時觀察癥狀的產(chǎn)生情況，而且使鑒定結(jié)果更穩(wěn)定可靠；并且根據(jù)浸染情況可以及時對小麥作出合理防治。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于農(nóng)作物病害檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種能夠及時觀察小麥黑胚病癥狀的接種鑒定方法。

背景技術(shù)

小麥黑胚病是指小麥籽粒表面有不同形狀和程度的黑色、褐色等癥狀，該病不僅降低小麥籽粒的外觀品質(zhì)，使小麥在市場上的出售級別降低而影響農(nóng)民收入，而且降低種子發(fā)芽率，影響面粉品質(zhì)，給小麥生產(chǎn)帶來嚴(yán)重的危害。

小麥黑胚病病因復(fù)雜，受致病菌、環(huán)境因素及品種特性的影響，其嚴(yán)重程度隨品種、地點(diǎn)、年份及防治措施等因素的不同而變化，各國報道的發(fā)病率一般在0.3～66.7%之間變化（參見：1、Li Q Y, Qin Z, Jiang Y M, Shen C C, Duan Z B, and Niu J S.Screening wheat genotypes for resistance to black point and the effects ofdiseased kernels on seed germination. J Plant Dis Protect, 2014, 121 (2): 79-88； 2、Fernandez, M. R., Sissons, M., Conner, R. L., Wang, H., amd Clarke, J.M. 2011. Influence of biotic and abiotic factors on dark discoloration ofdurum wheat kernels. Crop Sci. 51:1205-1214；3、代君麗，于巧麗，袁虹霞，邢小萍，張猛，孫炳劍，李洪連. 河南省小麥黑胚病菌的分離鑒定及致病性測定. 植物病理學(xué)報,2011, 41(3), 225-231.）。

小麥黑胚病是籽粒病害，在籽粒灌漿期發(fā)生發(fā)展，因?yàn)樽蚜Ｍ庥蟹f殼包被，不能及時觀察黑胚病的癥狀形成情況，如果去掉穎殼又會對籽粒生長造成嚴(yán)重傷害甚至造成籽粒脫落，這給小麥黑胚病抗病機(jī)理研究、菌與寄主互作、病害防治等研究工作帶來了一定的困難。目前，針對小麥黑胚病接菌鑒定方法的報告，都是在小麥穗部直接噴灑接菌，進(jìn)行或者不進(jìn)行保濕處理，成熟后統(tǒng)計(jì)發(fā)病率（參見：3、代君麗，于巧麗，袁虹霞等. 植物病理學(xué)報,2011, 41(3), 225-231；4、康業(yè)斌，劉順通，成玉梅，段愛菊. 小麥對黑胚病的抗性及黑胚對產(chǎn)量損失的影響，植物保護(hù)，1999，3:25-27）。因?yàn)榉f殼的阻隔，這些鑒定方法都無法及時的直接觀察接菌后籽粒癥狀形成情況，而且由于沒有直接將菌接在籽粒上，降低了致病菌的侵染效果，從而影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。因此，非常有必要探索一種小麥黑胚病接菌鑒定的方法，使致病菌直接侵染小麥籽粒、提高侵染效果確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果穩(wěn)定真實(shí)可靠，又能直接觀察黑胚病的癥狀形成情況。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是：針對直接噴灑接菌方法不能及時觀察癥狀產(chǎn)生，以及菌與籽粒由于穎殼阻隔導(dǎo)致鑒定結(jié)果準(zhǔn)確性降低的不足，本發(fā)明提供一種能夠及時觀察小麥黑胚病癥狀的接種鑒定方法。本發(fā)明首先在小麥抽穗后、籽粒未發(fā)育前將穎殼剪掉一部分，待籽粒滿仁后再噴灑接菌套袋保濕鑒定，不僅使噴灑的致病菌孢子可以直接與籽粒接觸，而且可以及時觀察籽粒上黑胚病癥狀發(fā)生的情況，同時根據(jù)該浸染情況可以及時對小麥作出合理的防治措施。由此，本發(fā)明首次提供了一種剪殼接菌鑒定小麥黑胚病的方法，不僅可以及時觀察癥狀的產(chǎn)生情況，而且使鑒定結(jié)果更穩(wěn)定可靠；并且根據(jù)浸染情況可以及時對小麥作出合理防治。

為了解決上述問題，本發(fā)明采取的技術(shù)方案為：