[發明專利]鴨坦布蘇病毒滅活疫苗的制備及使用方法

在審

• 申請號: 201610164617.6
• 申請日: 2016-03-22
• 公開（公告）號: CN105688203A
• 公開（公告）日: 2016-06-22
• 發明（設計）人: 魏思遠;趙光偉
• 申請（專利權）人: 重慶三杰眾鑫生物工程有限公司
• 主分類號: A61K39/12
• 分類號: A61K39/12;A61P31/14
• 代理公司: 重慶百潤洪知識產權代理有限公司 50219
• 代理人: 高姜

1.鴨坦布蘇病毒滅活疫苗的制備及使用方法，其特征在于，包括種毒、抗 原的制備、抗原的鑒定、疫苗的制備和疫苗的檢驗，

所述第一步種毒：鴨坦布蘇病毒從26齡發病雛鴨中分離，鑒定，經易感鴨 胚傳代至第9代獲得；

第二步抗原的制備：將獲得的鴨坦布蘇病毒種毒用生理鹽水10000倍稀釋， 經尿囊腔接種11日齡易感鴨胚，0.1ml/胚，收集接種48～120小時死亡鴨 胚尿囊液，無菌檢驗合格，即為抗原，于-40℃保存；

在第三步對病毒含量、純凈性、特異性免疫原性進行鑒定，其中病毒含量 的鑒定中：抗原用生理鹽水10倍系列稀釋，取10^-4、10^-5、10^-6和10^-74個 稀釋度接種9日齡易感鴨胚，每個稀釋度各接種5枚，0.1ml/胚，用蠟封孔， 于37.5℃靜置孵化，24小時以前死亡的鴨胚棄去不計，收集24～168小時 死亡鴨胚，按Reed-Muench法計算病毒含量為10^-6.50ELD₅₀/0.1ml。

2.根據權利要求1所述的鴨坦布蘇病毒滅活疫苗的制備及使用方法，其特 征在于：所述疫苗的制備：滅活抗原加入轉移因子和鴨白細胞介素2，使轉移因 子終濃度為4mg/ml，鴨白細胞介素2終濃度為5μg/ml，滅活前的鴨坦布蘇病 毒含量大于等于10^-6.0ELD₅₀/0.1ml，分裝，2-8℃保存，即為鴨坦布蘇病毒轉移因 子-白細胞介素2佐劑滅活疫苗。