[發(fā)明專利]一種真菌菌絲總DNA提取液及提取真菌菌絲總DNA的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201610163675.7 | 申請日： | 2016-03-20 |
| 公開（公告）號： | CN105602941B | 公開（公告）日： | 2018-03-20 |
| 發(fā)明（設計）人： | 郭巍;畢揚;張艷杰;李亞寧;趙丹;張汀;劉大群;楊寶東;陳艷 | 申請（專利權）人： | 北京農學院 |
| 主分類號： | C12N15/10 | 分類號： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京聿華聯(lián)合知識產權代理有限公司11611 | 代理人： | 劉烽 |
| 地址： | 102206 北*** | 國省代碼： | 北京;11 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 真菌 菌絲 dna 提取 方法 | ||
1.一種真菌菌絲總DNA提取液，其包括提取液I和提取液II，其中所述提取液I包括緩沖鹽、非離子表面活性劑、以及中性鹽的水溶液，其pH值為7.5-8.5；所述提取液II包括緩沖鹽和陽離子表面活性劑，其pH值為7.5-8.5；所述陽離子表面活性劑為陽離子聚丙烯酰胺。
2.根據權利要求1所述的提取液，其特征在于，所述非離子表面活性劑為醇醚硫酸鹽。
3.根據權利要求2所述的提取液，其特征在于，所述非離子表面活性劑為脂肪醇醚硫酸銨和/或脂肪醇醚硫酸鈉。
4.根據權利要求3所述的提取液，其特征在于，所述非離子表面活性劑為C12～C18的脂肪醇醚硫酸銨和/或脂肪醇醚硫酸鈉。
5.根據權利要求4所述的提取液，其特征在于，所述非離子表面活性劑為C12～C15的脂肪醇醚硫酸銨和/或脂肪醇醚硫酸鈉。
6.根據權利要求1所述的提取液，其特征在于，所述緩沖鹽選自Tris-HCl、磷酸鈉、磷酸氫二鈉和磷酸二氫鈉中的至少一種。
7.根據權利要求1所述的提取液，其特征在于，所述中性鹽為氯化鹽。
8.根據權利要求7所述的提取液，其特征在于，所述氯化鹽為氯化鈉和/或氯化鉀。
9.一種提取真菌菌絲總DNA的方法，包括如下步驟：
(1)收集真菌菌絲體；
(2)將真菌菌絲體置于如權利要求1-8任意一項中的所述提取液I；
(3)凍融至少1次；
(4)加入如權利要求1-8任意一項中的所述提取液II；
(5)去除不溶物，獲得含有真菌DNA的上清液。
10.根據權利要求9所述的方法，其特征在于，凍融至少2次。
11.根據權利要求10所述的方法，其特征在于，凍融至少3次。
12.根據權利要求9所述的方法，其特征在于，以體積計，所述提取液I與所述提取液II的比例為10:(1-5)。
13.根據權利要求12所述的方法，其特征在于，所述提取液I與所述提取液II的比例為10:(1.5-2.5)。
14.根據權利要求9至13中任意一項所述的方法，其特征在于，在步驟(3)中，冷凍的溫度為零下196℃至零下20℃，融化的溫度為40℃至70℃。
15.根據權利要求14所述的方法，其特征在于，所述冷凍的溫度為零下196℃，融化的溫度為50℃至60℃。
16.根據權利要求9至13中任意一項所述的方法，其特征在于，以離心的方式去除所述不溶物。
17.根據權利要求16所述的方法，其特征在于，離心速度為10000-15000rpm，離心時間為1-5分鐘。
18.根據權利要求9至13中任意一項所述的方法，其特征在于，還包括步驟(6)將所述上清液中的所述真菌DNA沉淀后溶于TE緩沖液中或去離子水中。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于北京農學院，未經北京農學院許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業(yè)授權和技術合作，請聯(lián)系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201610163675.7/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
